Imagerie et analyse cellulaires
Acquisition et analyse de données quantitatives pour les applications avec modèles cellulaires
Imagerie cellulaire : Acquisition et analyse
Il existe plusieurs options dans les méthodes d’imagerie cellulaire, allant de la microscopie en contraste de phase qui montre des cellules intactes jusqu'à l’imagerie par fluorescence de molécules ou d’organites uniques. L’analyse cellulaire est réalisée pour évaluer et mesurer l’état actuel des cellules, comme leur intégrité, leur toxicité et leur viabilité. Elle permet également diverses autres applications de recherche. Le recueil de données, leur analyse et leur exportation sous un format utile et pertinent sont des éléments essentiels de l’analyse cellulaire.
Flux de travail de l’analyse cellulaire
Les protocoles de culture, d’ensemencement et de maintien des cellules varient selon les différents modèles cellulaires. Toutefois, les étapes ci-dessous décrivent un flux de travail général pour les tests d’imagerie de cellules vivantes allant de la préparation des milieux en amont jusqu'à l’analyse expérimentale en aval avec un système d’imagerie haut contenu et un logiciel d’analyse cellulaire.
- Mettez les cellules en plaque dans un dispositif de laboratoire de votre choix (lames, boîtes, microplaques).
- Traiter les cellules – Effectuez les traitements des cellules avec les composés souhaités si cela fait partie du flux de travail du test
- Coloration des marqueurs : Si nécessaire, marquez les cellules avec les fluorophores de votre choix (colorants fluorescents, fusions protéine fluorescente-peptides, etc.
- Acquérir l’image des cellules – Placer la plaque dans le système d’imagerie cellulaire et commencer l’acquisition des images des cellules vivantes
- Analyse de l’image des cellules – Utilisez le logiciel d’analyse d’imagerie cellulaire pour réaliser une analyse quantitative des images de cellules vivantes
Accélérez votre criblage grâce à l’imagerie automatisée à haut contenu
Ce webinaire technique traitera des applications de criblage haut contenu, telles que celles impliquées dans la recherche sur les virus, les études portant sur l’excroissance des neurites et les modèles d’organoïde. Les informations fournies concerneront les chercheurs travaillant actuellement avec des tests cellulaires et exécutant l’imagerie sur cellules vivantes, ainsi que ceux souhaitant automatiser et/ou augmenter leur flux de travail d’imagerie actuel.
Types de méthodes d’imagerie cellulaire
Que la demande concerne un système à haut contenu et haut débit ou un système simple à utiliser, nos solutions d’imagerie cellulaire peuvent prendre en charge l’acquisition et l’analyse adaptées aux besoins d’un laboratoire de criblage ou de recherche. Ici, nous décrivons brièvement plusieurs méthodes d’imagerie cellulaire :
- La microscopie en contraste de phase montre des cellules intactes
- L’imagerie par fluorescence peut montrer des molécules ou des organites uniques
- La microscopie à fond clair est utile pour visualiser rapidement les cellules entières
- La microscopie confocale est privilégiée pour des images haute qualité et la reconstruction 3D des cellules
- L’imagerie de cellules vivantes en 4D associe la microscopie confocale à la vidéomicroscopie accélérée
- La microscopie automatisée utilise des fonctionnalités logicielles et matérielles garantissant une mise au point fiable dans chaque champ de vision. De plus, associée à un logiciel d’analyse d’images sophistiqué, elle génère des données quantitatives reproductibles et subjectives.
Applications et tests cellulaires courants
Ici, nous avons mis en avant plusieurs sujets concernant les tests cellulaires, allant des cultures cellulaires 3D à la recherche sur les cellules souches, en passant par les applications de criblage des cardiomyocytes et de la toxicité.
Dernières ressources
Flux de travail d’imagerie et d’analyse cellulaires
Flux de travail d’imagerie et d’analyse cellulaires
ENSEMENCEMENT DE CELLULES
Ensemencez les cellules adhérentes ou en suspension dans l’appareil de laboratoire de votre choix (boîtes de Petri, lames de culture ou microplaques). Incubez les cellules dans des conditions de culture normales (à savoir, 37 °C, 5 % de CO2). Pour les cellules adhérentes, l’incubation des cellules ensemencées pendant une nuit permet largement la fixation et la croissance des cellules.
Plaques à 96 ou 384 puits
La plupart des cultures cellulaires pour le criblage haut débit et haut contenu sont exécutées avec des microplaques à 96 ou 384 puits.
TRAITEMENT AVEC DES COMPOSÉS
Si le protocole l’exige, traitez les cellules avec des composés d’intérêt.
Des composés peuvent être ajoutés aux cellules pendant plusieurs minutes ou plusieurs jours selon le mécanisme d’action des composés et la réponse biologique étudiée. Par exemple, les tests d’apoptose ou d’internalisation des récepteurs requièrent généralement des périodes d’incubation plus courtes, tandis que les tests de cytotoxicité à paramètres multiples requièrent des périodes plus longues. Un traitement plus long des composés peut nécessiter le remplacement des composés pendant l’incubation
COLORATION POUR LES MARQUEURS
Les cellules vivantes peuvent être colorées avec divers fluorophores ou transfectées/transduites avec des concepts contenant des fusions protéine fluorescente-peptides. Les instructions du fabricant doivent être suivies lors de la coloration. La coloration n’est pas nécessaire pour toutes les applications avec cellules vivantes et l’imagerie et l’analyse sans marquage permettent de suivre et de surveiller les cellules en fond clair uniquement.
Kits d'essai
Kits de test robustes et faciles à utiliser pour les recherches en sciences de la vie, la découverte et le développement de médicaments et les tests biologiques. Nos kits de test sont optimisés pour une utilisation sur nos instruments. Criblez davantage de composés plus tôt dans le processus de découverte de médicaments et permettez la caractérisation d’un profil complet concentration-réponse des composés analysés.
Gamme d’imagerie haut contenu ImageXpress
Nos systèmes d’analyse et d’imagerie haut contenu, grâce à leur très grande flexibilité, vous permettent de faire évoluer facilement votre système en fonction de vos recherches. Ces systèmes proposent des options et des modules adaptés à vos recherches spécifiques, notamment différents objectifs, filtres, modes d’imagerie et conditions environnementales.
ACQUISITION D’UNE IMAGE DE CELLULES VIVANTES
Pour les acquisitions en vidéo accélérée continues, configurez la durée totale pour la série et les intervalles d’imagerie, à savoir, une image toutes les heures pendant 24 heures.
Les acquisitions discontinues en vidéo accélérée peuvent être réalisées à l'endroit où la plaque est mise et sortie de l’incubateur et évaluées par imagerie à différents points de capture dans le temps.
ANALYSE D’UNE IMAGE CELLULAIRE
Analysez les images avec un logiciel d’analyse d’imagerie cellulaire afin de générer des affichages multiparamétriques des réponses biologiques étudiées. Il est possible de générer et d’examiner des données de cinétique pour les acquisitions en vidéo accélérée.
https://share.vidyard.com/watch/ABJi1T62w9u2H6GTC59Uxx
Imagerie cellulaire Logiciel d’acquisition et d’analyse
Le logiciel d’acquisition et d’analyse d’images haut contenu MetaXpress® est une solution complète pour l’analyse haut contenu avec un flux de travail intégré et bien organisé. La gamme de modules d’application permet de répondre à de nombreux besoins, que ce soit concernant la facilité d'utilisation ou la conception de tests exclusifs. Le logiciel inclut des outils élégants et puissants pour l’imagerie 2D et 3D comme la vidéomicroscopie. Avec l’aide de notre assistant de paramétrage d’acquisition, vous pourrez commencer à générer des données en quelques minutes.