Excroissance des neurites
Obtenez de précieuses données pour interpréter la neurobiologie, allant de l’évaluation des neurones dérivés d’iPSC à l’analyse des organoïdes neuronaux en 3D.
Simplifiez la caractérisation des neurones en utilisant un test d’excroissance des neurites pour étudier le développement neuronal et la dégénérescence 𝘪𝘯 𝘷𝘪𝘵𝘳𝘰
Les neurones établissent des connexions grâce aux extensions de leur corps cellulaire, appelées axones ou dendrites, qui sont communément appelés « neurites » ou « prolongements ». Ce phénomène biologique, connu sous le nom d’excroissance des neurites, est régulé par des événements complexes de signalisation intracellulaire.
L’excroissance des neurites est un test couramment utilisé pour étudier le développement neuronal et la dégénérescence neuronale in vitro. Le développement des neurites repose sur une interaction complexe entre les signaux intra et extracellulaires. La croissance des neurites peut être stimulée ou inhibée par des facteurs neurotrophiques. Qui plus est, le développement des neurones peut être affecté par des substances chimiques neurotoxiques.
La compréhension des mécanismes de signalisation qui conduisent à l’excroissance des neurites fournit des informations importantes pour l’interprétation des réponses neurotoxiques et des données de criblage des composés, ainsi que pour l’interprétation des facteurs influençant le développement et la régénération des neurones. L’inhibition ou la stimulation de l’excroissance des neurites intervient dans un grand nombre de troubles et de lésions du SNC, notamment dans les accidents vasculaires cérébraux, la maladie de Parkinson, la maladie d’Alzheimer et les lésions de la moelle épinière.
Solution pour l’analyse de l’excroissance des neurites
L’analyse de l’excroissance des neurites s'effectue par la segmentation et la quantification des processus neuronaux. Ces processus neuronaux peuvent être évalués par imagerie au moyen d’un microscope à fluorescence et quantifiés par un tracé et un comptage manuels lorsque le débit est faible. Toutefois, pour les échantillons traités par microplaque à un débit plus élevé, un système d’imagerie automatisé associé au logiciel d’analyse constitue une solution plus efficace.
Le flux de travail illustre un processus simplifié d'analyse de l’excroissance des neurites et met en avant des systèmes vous permettant d'optimiser vos recherches et d'augmenter votre débit.
- Culture de cellules neuronales : Les cellules ont été mises en culture et ont formé des réseaux de neurites dans des microplaques à 96 ou 384 puits.
- Traitement par des composés : Les cellules ont ensuite été exposées à des composés toxiques pendant 48 heures.
- Coloration pour l’identification de marqueurs : Une fois le traitement par les composés terminé, des colorants pour cellules vivantes peuvent être directement ajoutés aux milieux. Des protocoles d’immunomarquage avec des anticorps conjugués par fluorescence peuvent également être exécutés après la fixation des cellules.
- Acquisition d’images neuronales : L’imagerie haut contenu des neurones vous permet de caractériser et de mesurer les variations au niveau des réseaux neuronaux, telles que le nombre de neurites, leur longueur et le branchement, et permet également de déterminer les réactions de toxicité générales ou spécifiques. Obtenez des images avec une optique à large champ pour l'échantillonnage d'un plus grand nombre de cellules sur un nombre inférieur de sites par puits, offrant ainsi une bien plus grande acquisition des plaques.
- Analyse du réseau neuronal : L’analyse haut contenu fournit une méthode quantitative pour déterminer les effets des facteurs positifs et négatifs sur l’excroissance des neurites. Utilisez un logiciel d’analyse d’imagerie cellulaire pour exécuter une analyse quantitative des images des cellules neuronales afin de caractériser plusieurs paramètres, notamment le nombre de prolongements par cellule, la longueur de l’excroissance des neurites, la ramification et le nombre de cellules.
Tests et applications de l’excroissance des neurites
L’imagerie à haut contenu des neurones vous permet de caractériser et de mesurer les variations au niveau des réseaux neuronaux, telles que le nombre de neurites, leur longueur et ramification, et vous permet également de déterminer les réactions générales ou spécifiques de toxicité.
Découvrez comment capturer et quantifier les activités neuronales rapidement et de façon exacte en utilisant la microscopie automatisée et un logiciel d’analyse haut contenu :