Le Dementia Research Institute de l’Université de Cardiff utilise le système FLIPR Penta pour étudier le rôle de la microglie dans la maladie d’Alzheimer

Le Dr Emily Maguire et son équipe de l’institut britannique de recherche sur la démence de l’Université de Cardiff cherchent à identifier les causes de la maladie d’Alzheimer afin d’améliorer les soins, le diagnostic et, en fin de compte, le traitement des patients.

Les recherches menées dans le groupe d’Emily se concentrent sur l’identification des différences entre les cellules cérébrales de personnes atteintes ou non de la maladie d’Alzheimer. Plus précisément, l’équipe étudie une classe particulière de cellules immunitaires cérébrales appelées microglie, qui se sont révélées être des contributeurs essentiels à la progression de la maladie d’Alzheimer. Elle utilise des tests génétiques pour estimer le risque de maladie d’Alzheimer et recueille des échantillons de sang dans deux groupes : des personnes à faible risque et des personnes à risque élevé déjà touchées par la maladie. Les cellules sanguines sont transformées en cellules souches, puis différenciées en microglie. Cette approche permet à l’équipe de comparer la microglie de personnes à risque élevé et de celles à faible risque et d’identifier des différences liées à la maladie d’Alzheimer. Ces recherches devraient vous permettre de développer des traitements spécifiques pour la maladie d’Alzheimer à l’avenir.

Un corpus important de recherches scientifiques antérieures documente largement le dysfonctionnement de la signalisation du calcium dans les cellules touchées par la maladie d’Alzheimer. Le Dr Maguire indique que c’est la raison pour laquelle il était important de comparer les variations de signalisation du calcium entre la microglie saine et la microglie malade. Le Dr Maguire avait précédemment examiné la signalisation du calcium dans des cellules présentant des niveaux variables de risque de démence au niveau d’une cellule individuelle à l’aide d’un microscope inversé. Bien que cette technique fournisse des données utiles, elle s’est avérée complexe et fastidieuse. Par conséquent, face au défi de l’étude de la signalisation du calcium dans 60 lignées cellulaires, le FLIPR Penta s’est avéré être la solution idéale.

L’équipe a utilisé le FLIPR Penta pour comparer la réponse de la microglie de patients présentant un risque élevé de maladie d’Alzheimer à celle de patients présentant un faible risque de maladie d’Alzheimer lorsqu’elle était exposée à des modulateurs du calcium connus. Ces comparaisons visaient à identifier des divergences de signalisation du calcium entre les cellules malades et non malades, ce qui pourrait faire la lumière sur la pathologie sous-jacente.

L’approche consistait à ensemencer les cellules dans une microplaque à 384 puits et à les colorer avec un colorant vert fluorescent au calcium 6 de MOLECULAR DEVICES. Après l’incubation, un composé spécifique (p. ex., ATP) était chargé sur une autre microplaque. Les deux microplaques étaient placées dans le FLIPR Penta , qui ajoutait le composé aux cellules et enregistrait les modifications de fluorescence avant et pendant 5 minutes après l’ajout du composé. Ce protocole a permis à l’équipe de mesurer le calcium libéré lors de l’application du composé et, par conséquent, le niveau de signalisation cellulaire. Pour standardiser les résultats, l’équipe a également pris une image de la microplaque de cellules et a normalisé les mesures de fluorescence en fonction du nombre de cellules dans chaque puits, ce qui lui a permis d’obtenir des comparaisons précises et fiables entre les puits.