L’Université de Leeds (Royaume-Uni) utilise ImageXpress Pico pour étudier le fonctionnement des protéines
ENTREPRISE/UNIVERSITÉ
Université de Leeds
MEMBRES DE L’ÉQUIPE
Darren Tomlinson
Heather Martin
PRODUITS UTILISÉS
Système d'imagerie cellulaire automatisé ImageXpress Pico
Le défi
Le laboratoire Tomlinson, de l’école de Biologie moléculaire et cellulaire de l’Université de Leeds (Royaume-Uni), étudie le fonctionnement des protéines au niveau moléculaire. Le groupe de recherche de Darren Tomlinson souhaite utiliser un nouvel outil de reconnaissance moléculaire, appelé Affimer, pour étudier le fonctionnement des protéines. Un Affimer (également connu sous le nom d’Adhiron) est une protéine de charpente qui contient deux boucles randomisées pour la reconnaissance moléculaire. Ils peuvent être utilisés comme réactifs alternatifs aux anticorps pour les applications telles que les diagnostics et être utilisés pour étudier la surface des protéines cibles afin d’identifier les principaux domaines impliqués dans le fonctionnement des protéines. Le laboratoire du groupe de recherche offre un service de criblage de nombreux types de molécules, mais son objectif est d’utiliser la protéine de charpente Affimer pour comprendre le fonctionnement des protéines au niveau moléculaire.
Pour étudier ces Affimers, le groupe avait besoin d’un système facile à utiliser permettant les criblages à petite échelle.
La solution
Le groupe a choisi l’ImageXpress Pico car il s’agit d’une alternative abordable et conviviale aux autres systèmes d’imagerie haut contenu.
Système d'imagerie cellulaire automatisé ImageXpress Pico
Produits utilisés
Le système d’imagerie cellulaire automatisé ImageXpress® Pico est bien plus qu’un microscope numérique, car il associe l'imagerie de haute résolution à une analyse puissante. Que vous utilisiez l’imagerie par fluorescence ou des analyses en fond clair, l’imageur automatisé propose un large éventail de protocoles préconfigurés pour les tests cellulaires pour réduire la courbe d’apprentissage et vous permettre de réaliser rapidement vos expériences. Avec des caractéristiques telles que la déconvolution à la volée Digital Confocal* 2D, Live Preview et la quantification en 3 couleurs à plusieurs longueurs d’onde, l’ImageXpress Pico vous permet de faire avancer vos découvertes avec un petit imageur abordable.
Les résultats
Le groupe utilise principalement l’ImageXpress Pico pour les criblages à petite échelle afin d’observer l’impact des protéines Affimer ciblant un grand nombre de protéines intracellulaires sur les voies de signalisation en aval des protéines ciblées. Un exemple se trouve à la Figure 1. Il montre des fibroblastes embryonnaires de souris transfectés avec des Affimers tagués GFP (en vert) marqués pour ERK phosphorylée (en orange). Il démontre que l’Affimer ciblant les protéines réduit l’expression de pERK stimulée par l'EGF.
Le groupe utilise également l’ImageXpress Pico pour les expériences dans le temps, dans lesquelles la fonction de contrôle de la température est particulièrement utile.
Le groupe réalise à présent l’étude d’imagerie d’environ 2-3 plaques par jour, selon le test, car il a tendance à utiliser 3-4 fluorophores/plaque.
Figure 1 : Fibroblastes embryonnaires de souris transfectés avec des Affimers tagués GFP (en vert) et marqués pour l'ERK phosphorylée (en orange). Les flèches indiquent les cellules exprimant l'Affimer, dans lesquelles on observe nettement une diminution du marquage pERK. Images acquises sur l’ImageXpress Pico avec un agrandissement 20x.