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Enzyme - Tests IMAP
La technologie IMAP® offre un test homogène applicable à de nombreuses kinases, phosphatases et phosphodiestérases sans tenir compte de la séquence peptidique du substrat. Le test correspond à une simple procédure mix-and-read, mélanger et lire, permettant de déterminer l'activité enzymatique de manière précise.
- IMAP est un système de test complet pour le criblage des kinases, des phosphatases et des phosphodiestérases.
- Les tests IMAP n'étant pas basés sur des anticorps, sont génériques et peuvent être utilisés pour n'importe quelle kinase, phosphatase ou phosphodiestérase.
- Le signal de fluorescence robuste fournit des résultats fiables avec de bons facteurs Z.
- Les tests IMAP sont homogènes et adaptés à la miniaturisation pour de plus grandes économies.
- Les tests IMAP sont disponibles en modes de détection FP et TR-FRET afin de répondre aux besoins des utilisateurs en matière de criblage.
Vue d’ensemble des tests Enzymes – IMAP
Basé sur l'interaction spécifique haute affinité des groupes phosphate avec les nanoparticules contenant un métal trivalent (billes), le test IMAP est une plateforme générique sans anticorps permettant d'évaluer l'activité des kinases, phosphatases et phosphodiestérases. Une réaction enzymatique se produit en utilisant un substrat marqué par fluorescence. L'ajout du système de liaison IMAP arrête la réaction enzymatique et initie la liaison des billes aux substrats phosphorylés. La liaison du substrat aux billes, qui est corrélée à l'activité enzymatique, peut être détectée en utilisant la mesure FP ou TR-FRET.
Système de liaison progressive IMAP
Le système de liaison progressive IMAP permet aux chercheurs d'optimiser leurs conditions de test FP et TR-FRET pour chaque substrat utilisé. Le système est composé d'un tampon A et d'un tampon B de liaison progressive, et d'un réactif de liaison progressive. Les deux tampons et le réactif peuvent être combinés dans des proportions différentes en fonction du caractère acide du substrat choisi, des concentrations souhaitées de l'ATP et des paramètres de fond.
Substrats IMAP
Molecular Devices propose une large gamme de substrats et calibreurs validés. Les substrats peuvent être utilisés avec les enzymes pour lesquels ils ont été validés à l'origine, ou comme substrats potentiels pour d'autres enzymes.
• Les substrats IMAP validés avec des conditions de liaison optimisées garantissent les meilleures performances lors de l'utilisation de la plateforme IMAP.
• Les substrats sont disponibles en deux tailles et peuvent être utilisés avec IMAP FP et IMAP TR-FRET.
• Des dizaines de substrats différents ont été validés avec plus de 100 enzymes. De nombreux substrats sont disponibles avec un marqueur fluorescent rouge ou vert, permettant le multiplexage et offrant un moyen de gérer les problèmes liés à l'auto-fluorescence du composé.
Données sur les tests IMAP
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Données sur les échantillons IMAP FP : Courbe de dilution ROCKII
Courbes de dilution enzymatique pour ROCKII dans de la BSA et dans un tampon de réaction Tween IMAP à l'aide du système de liaison progressive. Conditions de réaction : Kinase ROCKII (Upstate : 14-451) comme indiqué, substrat dérivé de FAM-S6 100 nm (5FAM-AKRRRLSSLRA-COOH, R7184), ATP 100 µm. Conditions de la solution de liaison IMAP : 100 % de tampon A de liaison, réactif de liaison progressive 1:400.
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Détection FP par rapport à TR-FRET
Inhibition de l'Akt avec staurosporine : comparaison de la détection IMAP TR-FRET (en haut) et de la détection IMAP FP (en bas). Conditions de réaction : Kinase de l'Akt (0,1 u/ml, Upstate : 14-276), 300 nm, 1 µm, 3 µm FAM-Crosstide (5FAM-GRPRTSSFAEG-COOH, R7110), ATP 10 µm, staurosporine comme indiqué. Solution de liaison IMAP : 40 % de tampon A de liaison, 60 % de tampon B de liaison, réactif de liaison progressive 1:400.
Technologie des tests Enzyme – IMAP
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Tests génériques de kinase et phosphatase IMAP FP
Principes IMAP en utilisant la mesure FP : la solution de liaison est ajoutée après la réaction kinase en utilisant un peptide marqué par fluorescence. Le petit substrat fluorescent phosphorylé se lie aux grandes nanoparticules à base de M(III), ce qui réduit la vitesse de rotation du substrat et augmente par conséquent sa polarisation.
Tests génériques de kinase et phosphatase IMAP FP
Principes IMAP en utilisant la mesure FP : la solution de liaison est ajoutée après la réaction kinase en utilisant un peptide marqué par fluorescence. Le petit substrat fluorescent phosphorylé se lie aux grandes nanoparticules à base de M(III), ce qui réduit la vitesse de rotation du substrat et augmente par conséquent sa polarisation.
Tests génériques de phosphodiestérase IMAP FP
Principes IMAP en utilisant la mesure FP : la solution de liaison est ajoutée après la réaction de phosphodiestérase en utilisant un peptide marqué par fluorescence. Le petit substrat fluorescent phosphorylé se lie aux grandes nanoparticules à base de M(III), ce qui réduit la vitesse de rotation du substrat et augmente par conséquent sa polarisation.
Tests génériques de phosphodiestérase IMAP FP
Principes IMAP en utilisant la mesure FP : la solution de liaison est ajoutée après la réaction de phosphodiestérase en utilisant un peptide marqué par fluorescence. Le petit substrat fluorescent phosphorylé se lie aux grandes nanoparticules à base de M(III), ce qui réduit la vitesse de rotation du substrat et augmente par conséquent sa polarisation.
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Tests génériques de kinase et phosphatase TR-FRET
Principes IMAP en utilisant la mesure TR-FRET : la solution de liaison est ajoutée après la réaction de kinase en utilisant un peptide ou une protéine marqués par fluorescence. Dans ce système, la nanoparticule est dopée avec une molécule donneuse de terbium (Tb). En se liant à des nanoparticules à base de M(III), le substrat fluorescent phosphorylé se rapproche du Tb-Donneur, ce qui permet la mesure TR-FRET entre le Tb-Donneur et le substrat fluorescent phosphorylé.
Tests génériques de kinase et phosphatase TR-FRET
Principes IMAP en utilisant la mesure TR-FRET : la solution de liaison est ajoutée après la réaction de kinase en utilisant un peptide ou une protéine marqués par fluorescence. Dans ce système, la nanoparticule est dopée avec une molécule donneuse de terbium (Tb). En se liant à des nanoparticules à base de M(III), le substrat fluorescent phosphorylé se rapproche du Tb-Donneur, ce qui permet la mesure TR-FRET entre le Tb-Donneur et le substrat fluorescent phosphorylé.
Tests génériques de phosphodiestérase IMAP TR-FRET
Principes IMAP en utilisant la mesure TR-FRET : la solution de liaison est ajoutée après la réaction de phosphodiestérase en utilisant un peptide marqué par fluorescence. Dans ce système, la nanoparticule est dopée avec une molécule donneuse de terbium (Tb). En se liant à des nanoparticules à base de M(III), le substrat fluorescent phosphorylé se rapproche du Tb-Donneur, ce qui permet la mesure TR-FRET entre le Tb-Donneur et le substrat fluorescent phosphorylé.
Tests génériques de phosphodiestérase IMAP TR-FRET
Principes IMAP en utilisant la mesure TR-FRET : la solution de liaison est ajoutée après la réaction de phosphodiestérase en utilisant un peptide marqué par fluorescence. Dans ce système, la nanoparticule est dopée avec une molécule donneuse de terbium (Tb). En se liant à des nanoparticules à base de M(III), le substrat fluorescent phosphorylé se rapproche du Tb-Donneur, ce qui permet la mesure TR-FRET entre le Tb-Donneur et le substrat fluorescent phosphorylé.
Options de commande des tests Enzyme – IMAP
Kit de test IMAP
Kit démo d'évaluation IMAP - PN : R8166
Kit de démonstration d’évaluation IMAP
800 Kit IMAP points de données optimisé comprenant des calibreurs (peptides phosphorylés et non phosphorylés) pour réaliser une courbe d'étalonnage pour la détection FP ou TR-FRET.
N° R8166
Kit d’évaluation IMAP TR-FRET avec système de liaison progressive - PN : R8161
Kit d’évaluation IMAP TR-FRET avec système de liaison progressive
800Protocole points de données optimisé pour réaliser un test IMAP avec système de liaison progressive. Une kinase et un substrat supplémentaires sont nécessaires.
N° R8161
Kit d’évaluation IMAP FR PDE - PN : R8175
Kits d'évaluation IMAP FP PDE
N° R8175
Kit d’évaluation IMAP TR-FRET PDE (avec substrats AMPc et GMPc) - PN : R8176
Kits d’évaluation IMAP TR-FRET PDE
Comprend un protocole optimisé, et des substrats cAMP et cGMP. Le client doit utiliser ses propres enzymes PDE.
N° R8176
Ressources sur les tests Enzyme – IMAP
Livre électronique
Tests optimisés pour la recherche de pointe
Optimized Assays for Breakthrough Research
La recherche en biologie a été largement simplifiée par les kits de test, instruments et protocoles d’analyse normalisés commercialisés par les fabricants.
Affiche scientifique
Tests multiplex et en cascade avec la plate-forme de polarisation de fluorescence IMAP
Multiplexing and Cascade Assays with the IMAP Fluorescence Polarization Platform
Ce document met en évidence le multiplexage avec le système de liaison progressive IMAP, et les tests IMAP en cascade, ou couplés, permettant aux chercheurs HTS d’optimiser leurs tests pour chaque applica…
Affiche scientifique
Tests multiplex dans IMAP en utilisant le système de liaison progressive
Multiplex Assays in IMAP using the Progressive Binding System
La plateforme de tests de fluorescence polarisée (FP) IMAP est un système homogène générique pouvant s’appliquer à un grand nombre d’enzymes, notamment les protéines kinases. IMAP se base sur la haute affin…
Affiche scientifique
Tests de polarisation de fluorescence des protéases avec la plate-forme IMAP
Fluorescence Polarization Assays of Proteases with the IMAP Platform
Parcourez ce document pour découvrir la plateforme de tests par polarisation de la fluorescence IMAP qui est un système sans anticorps applicable à un grand nombre de protéines kinases.
Fiche technique
Technologie IMAP pour kinases, phosphatases et phosphodiestérases
IMAP Technology for Kinases, Phosphatases and Phosphodiesterases
Obtenez des informations sur la technologie IMAP exclusive qui fournit un test homogène non radioactif pour l’activité des kinases.
Note d'application
Tests de kinase IMAP FP sur le lecteur de microplaques multimode SpectraMax M5
IMAP FP kinase assays on the SpectraMax M5 Multi-Mode Microplate Reader
Les protéines kinases sont essentielles à la régulation de nombreux processus cellulaires. Depuis quelques années, elles forment l’une des principales classes de cellules effectrices pour le cancer et plusieurs...
Note d'application
Tests de phosphodiestérase IMAP sur les lecteurs de microplaques multimode SpectraMax
IMAP phosphodiesterase assays on SpectraMax Multi-Mode Microplate Readers
Les PDE, phosphodiestérases nucléotidiques cycliques, forment un groupe d’enzymes qui dégradent la liaison phosphodiester du cAMP et du cGMP, les messagers secondaires participant à une diversité de…
Produits et services compatibles avec les tests Enzyme – IMAP
Applications particulières

Tests génériques de kinase et phosphatase IMAP FP
Principes IMAP en utilisant la mesure FP : La solution de liaison est ajoutée après la réaction kinase en utilisant un…

Tests génériques de phosphodiestérase IMAP FP
Principes IMAP en utilisant la mesure FP : La solution de liaison est ajoutée après la réaction phosphodiestérase…

Tests génériques de kinase et phosphatase TR-FRET
Principes IMAP en utilisant la mesure TR-FRET : La solution de liaison est ajoutée après la réaction kinase en utilisant un…

Tests génériques de phosphodiestérase IMAP TR-FRET
Principes IMAP en utilisant la mesure TR-FRET : La solution de liaison est ajoutée après la réaction phosphodiestérase…
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Nos équipes hautement qualifiées sont en première ligne avec vous, réalisant des démonstrations des produits à distance ou sur site, des webinaires, et bien plus encore, pour vous aider à résoudre les défis liées à vos recherches. Comment pouvons-nous vous aider aujourd’hui ?
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