Kit Calcium Fura-2 QBT
Le kit Calcium Fura-2 QBT élimine la cause de variabilité des données et réduit le nombre d'étapes par rapport aux protocoles de lavage classiques utilisant Fura-2. En associant notre technologie de masquage exclusive à l'indicateur de calcium ratiométrique Fura-2 standard de l'industrie, les chercheurs peuvent :
- Obtenir la plus grande fenêtre de signal Fura-2 disponible.
- Éliminer les artefacts de lavage et augmenter le débit avec un test homogène.
- Réduire l'impact sur les résultats d'une charge irrégulière du colorant et des fuites.
- Interroger des cellules faible densité, peu ou pas adhérentes, en utilisant un protocole sans lavage.
- Effectuer des tests sur les systèmes FlexStation® 3 et FLIPR® Tetra
- Référencer des milliers de citations où Fura-2 a été utilisé pour des lignées cellulaires et des cibles.
Données sur le kit de test Fura-2 QBT Calcium
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Agonisme du récepteur muscarinique M1 sur des cellules CHO M1
Sur le lecteur de microplaques multimode FlexStation® 3, le carbachol a été utilisé pour stimuler le récepteur muscarinique M1 sur des cellules CHO M1 afin de générer des courbes de dose-réponse en comparant le colorant Fura-2 QBT au kit BD et au protocole de lavage Fura-2 classique. Les valeurs de C.E.50 étaient identiques pour toutes les méthodes et se situaient dans la plage des valeurs publiées.
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Antagonisme du récepteur muscarinique M1 sur des cellules CHO M1
Sur le lecteur de microplaques multimode FlexStation 3, 50 nM de carbachol ont été utilisés comme agoniste stimulant par rapport à un antagoniste CRC de l’atropine. Ce kit de test Fura-2 QBT Calcium expérimental a fourni la plus grande fenêtre de signal et les facteurs Z les plus robustes à la C.E.80.
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Agonisme du récepteur H1 endogène sur des cellules HeLa
L'histamine a été utilisée pour stimuler les récepteurs histaminiques endogènes des cellules HeLa. Les mesures du test ont été prises en utilisant le système de criblage cellulaire à haut débit FLIPR Tetra® avec des LED UV. Les courbes de dose-réponse ont été générées en comparant le colorant Fura-2 QBT au kit calcium ratiométrique BD et au protocole de lavage Fura-2 classique. Les valeurs de EC50 étaient se situaient dans un demi-log alors que le facteur Z à le EC80 était le plus important avec le kit Fura-2 QBT Calcium.
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Antagonisme du récepteur H1 endogène sur des cellules HeLa
Les mesures du test ont été prises à l’aide du système de criblage cellulaire à haut débit FLIPR Tetra avec des LED UV et a utilisé une configuration expérimentale et des paramètres du système semblables à ceux de la Figure 3. L’histamine 40 nM a été utilisée comme agoniste stimulant par rapport à un antagoniste CRC de pyrilamine.
Technologie du kit de test Fura-2 QBT Calcium
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Mécanisme des kits de test
Le kit Fura-2 QBT de dosage du calcium utilise Fura-2, AM, un colorant sensible au calcium qui est absorbé dans le cytoplasme de la cellule durant l'incubation, où les groupements de blocage lipophiles sont clivés, résultant en un colorant fluorescent chargé négativement qui demeure dans la cellule. Lors de l'activation de la cible, le calcium intracellulaire est libéré, se liant avec le colorant, augmentant ainsi l'intensité de la fluorescence. Ce kit utilise la technologie de masquage extracellulaire pour bloquer la fluorescence de fond et augmenter la fenêtre de signal de votre test et réduire le nombre d'étapes de test.
Mécanisme des kits de test
Le kit Fura-2 QBT de dosage du calcium utilise Fura-2, AM, un colorant sensible au calcium qui est absorbé dans le cytoplasme de la cellule durant l'incubation, où les groupements de blocage lipophiles sont clivés, résultant en un colorant fluorescent chargé négativement qui demeure dans la cellule. Lors de l'activation de la cible, le calcium intracellulaire est libéré, se liant avec le colorant, augmentant ainsi l'intensité de la fluorescence. Ce kit utilise la technologie de masquage extracellulaire pour bloquer la fluorescence de fond et augmenter la fenêtre de signal de votre test et réduire le nombre d'étapes de test.
Modification du signal du flux de calcium
Le Fura-2 lié au calcium est excité à 340/510 nm et la forme non liée à 380/510 nm. Lors du flux de calcium, la concentration du calcium cytoplasmique augmente, provoquant l'augmentation proportionnelle de l'intensité de fluorescence à 340/510 nm. À l'inverse, l'intensité 380/510 nm diminue de manière synchronisée avec la diminution de la concentration du colorant non lié. En établissant le rapport des intensités de fluorescence produites par l'excitation à deux longueurs d’onde, les artefacts associés à la distribution inégale du colorant et la variation du nombre de cellules sont réduits car ils affectent les mesures de manière égale.
Modification du signal du flux de calcium
Le Fura-2 lié au calcium est excité à 340/510 nm et la forme non liée à 380/510 nm. Lors du flux de calcium, la concentration du calcium cytoplasmique augmente, provoquant l'augmentation proportionnelle de l'intensité de fluorescence à 340/510 nm. À l'inverse, l'intensité 380/510 nm diminue de manière synchronisée avec la diminution de la concentration du colorant non lié. En établissant le rapport des intensités de fluorescence produites par l'excitation à deux longueurs d’onde, les artefacts associés à la distribution inégale du colorant et la variation du nombre de cellules sont réduits car ils affectent les mesures de manière égale.
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Décalage spectral du colorant Fura-2 QBT Calcium en cas de liaison à Ca2+
Le colorant Fura-2 QBT™ Calcium est excité à 340 nm et 380 nm, avec émission à 510 nm. Lors du flux de calcium, les changements de concentration du calcium intracellulaire peuvent être mesurés.
Décalage spectral du colorant Fura-2 QBT Calcium en cas de liaison à Ca2+
Le colorant Fura-2 QBT™ Calcium est excité à 340 nm et 380 nm, avec émission à 510 nm. Lors du flux de calcium, les changements de concentration du calcium intracellulaire peuvent être mesurés.
Ressources sur le kit de test Fura-2 QBT Calcium
Livre électronique
Tests optimisés pour la recherche de pointe
Optimized Assays for Breakthrough Research
La recherche en biologie a été largement simplifiée par les kits de test, instruments et protocoles d’analyse normalisés commercialisés par les fabricants.
Affiche scientifique
Kit calcium ratiométrique Fura-2 QBT, un test homogène pour la mesure des tests de flux de calcium sur le système FLIPR Tetra et le lecteur de microplaques FlexStation 3
Fura-2 QBT Ratiometric Calcium Kit, a Novel Homogeneous Assay for Measuring Calcium Flux Assays on the FLIPR Tetra System and the FlexStation 3 Microplate Reader
Ce PDF présente le kit pour le calcium ratiométrique Fura-2 QBT qui permet d’économiser du temps et les coûts relatifs aux tampons. Grâce à ce kit, la variabilité entre puits est réduite et la fenêtre de signal est plus importante.
Note d'application
Kit Calcium Fura-2 QBT : un test homogène Fura-2 de dosage du calcium
Fura-2 QBT Calcium Kit: A homogenous Fura-2 calcium assay
Le kit de test Fura-2 QBT Calcium de Molecular Devices intègre une technologie de désactivation éprouvée avec un indicateur de calcium ratiométrique Fura-2 permettant un test homogène afin de minimiser…
Fiche technique
Tests du calcium pour le système FLIPR Tetra
Calcium assays for the FLIPR Tetra System
Cette fiche technique est destinée à la sélection des kits de test FLIPR et QBT Calcium qui représentent le premier choix pour la mesure des variations du calcium intracellulaire pendant le criblage de découverte de médicament et…
Produits et services compatibles avec le kit de test Fura-2 QBT Calcium
Applications particulières
Mécanisme des kits de test
Le kit de test Fura-2 QBT Calcium utilise Fura-2, AM, un colorant sensible au calcium qui est absorbé dans …
Modification du signal du flux de calcium
Le Fura-2 lié au calcium est excité à 340/510 nm et la forme non liée à 380/510 nm. Lors du flux du calcium…
Décalage spectral du colorant Fura-2 QBT Calcium en cas de liaison à Ca2+
Le colorant Fura-2 QBT™ Calcium est excité à 340 nm et 380 nm, avec émission à 510 nm. Lors du flux du calcium…
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