Vue d’ensemble du test Transfluor

En fixant un marqueur fluorescent à la bêta-arrestine, la localisation du complexe récepteur-arrestine peut être analysé durant l'activation du récepteur. La désensibilisation ne se produisant qu’avec un récepteur activé, la surveillance de la translocation de la bêta-arrestine et le recyclage ultérieur du récepteur offre une méthode de détection de l’activation des GPCR.

L’étude de ce mécanisme vous permet d’identifier l’impact des ligands des GPCR sur différents processus physiologiques, notamment le comportement, l’humeur, l’inflammation, le système nerveux et les réponses olfactives. De plus, les chercheurs peuvent accroître leurs connaissances sur les complexités de la dégradation et du recyclage des récepteurs pour une cible donnée.

Caractéristiques

  • Validé avec plus de 100 GPCR, le test Transfluor vous permet de travailler sur toutes les classes de GPCR (classes I, II, III), quelles que soient les protéines G qui interagissent (Gs, Gi/o et Gq/11).
  • La mesure unique est compatible avec tous les sous-types de GPCR, y compris Gi, Gs, Go, Gq, supprimant le besoin de multiples tests GPCR.
  • L’absence d’étiquetage ou de marquage des GPCR évite la biologie moléculaire personnalisée susceptible d’altérer la réponse de votre cible.
  • Le format universel ne nécessite aucune connaissance préalable des protéines G interagissant, permettant le criblage des GPCR orphelins.
  • La technologie basée sur la PFV ne nécessite aucun substrat supplémentaire pour surveiller la translocation de la bêta-arrestine.
  • Le module d’application MetaXpress® permet d’automatiser l’analyse du mouvement de la bêta-arrestine vers la membrane cellulaire (cavités) et les vésicules endocytaires.
  • L’essai de translocation indépendante du ligand (LITe™) est un test indépendant de l’agoniste utilisé pour vérifier la translocation de la bêta-arrestine-PFV dans les GPCR orphelins.

Données sur le test Transfluor

  • transfluor ix

    Images à haut contenu du test Transfluor

    Cellules exprimant la ß2AR stimulées avec de l’isoprotérénol. À gauche : contrôle, au centre : puits, à droite : vésicules. En haut : Essai Transfluor imagé avec ImageXpress. En bas : Essai Transfluor imagé avec Discovery-1.

  • Analyse de dose-réponse à l’isoprotérénol

    Segmentation et analyse exécutées à l’aide du module d’application du cyclage GPCR pour le logiciel d’acquisition et d’analyse d’images à haut contenu MetaXpress®. Les barres d’erreur affichent l’écart-type. Haut : puits, en bas : vésicules.

    D1_Fig5

  • Liste partielle des RCPG

    La Technologie Transfluor permet de surveiller l'activité des récepteurs en détectant le mouvement de la bêta-arrestine-GFP dans la cellule. Une liste partielle des RCPG indiqués comme intervenant dans la translocation de la bêta-arrestine-GFP est affichée ci-dessous.

    Autre liste de récepteurs

    • 12 RCPG de drosophile
    • Récepteur Frizzled Fz4
    • Facteur-ß de croissance transformant TßRIII

Technologie du test Transfluor

  • Essai RCPG orphelin

    Essai RCPG orphelin

    Contrairement aux méthodes actuelles de criblage des RCPG, la technologie Transfluor est basée sur le mécanisme d'interruption du signal RCPG, connu sous le nom de désensibilisation du récepteur. Ce mécanisme est commun à pratiquement tous les RCPG et est activé par la liaison au ligand. La technologie Transfluor ne nécessite aucune connaissance préalable de la protéine G interagissant. Cette caractéristique importante de la technologie Transfluor la rend idéale pour le criblage des RCPG orphelins (oGPCR).

    Une technique exclusive permettant de valider les criblages de RCPG orphelins, appelée LITe™ (translocation indépendante du ligand), est un essai indépendant de l'agoniste utilisé pour vérifier la translocation de la ß arrestine-GFP dans les RCPG orphelins.

Ressources sur le test Transfluor

Essai Transfluor

Nom du produit Numéro de référence
Kit d'évaluation Transfluor® (usage non commercial) R8177
Kit d'évaluation Transfluor® (usage commercial) R8178
Lignées cellulaires parentales U2OS (G418) rat b-arrestine 2-RrGFP TF-U2OS-rBA2GFP

Kit d'évaluation Transfluor

Le kit d'évaluation Transfluor permet d'utiliser la technologie pour une période d'évaluation unique limitée de six mois. Le kit fournit tous les outils nécessaires à l'évaluation de la technologie avec les propres instruments et RCPG de l'utilisateur. Cela permet à l'utilisateur de se familiariser avec la technologie, avant de passer à une option de licence différenciée pour répondre aux besoins spécifiques du client.

 

Composants du kit d'évaluation Transfluor

  • Cellules U-2 OS β-arrestine2-GFP (lignée cellulaire parentale, pour aider la détermination de la réponse du Transfluor au choix de RCPG de l'utilisateur final)
  • Plaque de démonstration Transfluor (plaque de qualité imagerie pour aider à la validation de l'instrument et à l'acquisition et à l'analyse de l'image)
  • Licence d'étiquette limitée
  • Fiche produit du kit d'évaluation Transfluor
  • Fiche produit des cellules U-2 OS β-arrestine2-GFP
  • Protocole de démarrage rapide Transfluor

 

Guide d'utilisation Transfluor (fourni avec les protocoles et consignes de dépannage)

Veuillez contacter votre représentant local pour obtenir des renseignements détaillés concernant ce kit.

Options de licence différenciées

L'utilisation de la technologie Transfluor nécessite l'achat de la licence d'utilisation de cette technologie auprès de Molecular Devices. Cette licence est renouvelable chaque année. Une structure de licence évolutive est disponible depuis la recherche jusqu'au criblage à haut débit, comprenant les exemples suivants :

  • Licence de site de recherche avec kit Transfluor
  • Licence globale de recherche avec kit Transfluor
  • Licence de site de criblage avec Transfluor
  • Licence de site de recherche et de criblage avec kit Transfluor

Deux licences tierces supplémentaires sont requises pour utiliser le test Transfluor : une licence GFP (Molecular Devices recommande la licence GFP Renilla reniformis (Rr) de Prolume) et la licence de redistribution de la fluorescence de BioImage. Les conditions sont les suivantes :

  • La licence Prolume est renouvelable chaque année pour une somme minime.
  • La licence BioImage est payable en une seule fois.
  • Les licences Prolume et BioImage offrent une couverture internationale.

Afin de simplifier vos opérations, ces licences sont disponibles directement auprès de Molecular Devices. De même, vous pouvez également les obtenir directement auprès de Prolume et BioImage.

Veuillez contacter votre représentant local pour obtenir des renseignements détaillés concernant ces licences. Outre la licence Transfluor, Molecular Devices fournit également une lignée cellulaire GFP bêta-arrestine de démarrage, transfectée de manière stable, et les plasmides adéquats.

Produits et services compatibles avec le test Transfluor

Prêt à démarrer ?

Nous vous aidons à relever vos défis. Nos solutions éprouvées, ainsi que des équipes hautement qualifiées présentes dans le monde entier, vous accompagnent dans la concrétisation de votre prochaine grande découverte.

Prêt à démarrer ?

Nous vous aidons à relever vos défis. Nos solutions éprouvées, ainsi que des équipes hautement qualifiées présentes dans le monde entier, vous accompagnent dans la concrétisation de votre prochaine grande découverte.