Vue d’ensemble du kit de test FLIPR Potassium
Le kit de test FLIPR Potassium exploite la perméabilité des ions thallium (Tl+) à travers les canaux potassiques voltage-dépendants et ligand-dépendants (K+). Dans ce test, un colorant indicateur Tl+ novateur et très sensible est utilisé pour produire un signal fluorescent brillant lors de la liaison aux ions Tl+ passés à travers les canaux potassiques. L’intensité du signal Tl+ est proportionnelle au nombre de canaux potassiques ouverts. Elle donne par conséquent une indication fonctionnelle sur les activités des canaux potassiques. De plus, un de nos colorants masquants exclusifs est utilisé pour atténuer encore plus la fluorescence résiduelle afin d'améliorer le rapport signal/bruit.
- Mesure fonctionnelle de l'activité des canaux potassiques dans un test cellulaire.
- Le protocole homogène, sans étape de lavage, diminue la variation d'un puits à l'autre et simplifie le flux de travail.
- Fenêtre de signal élargie comparée à un test non homogène.
- Procédure rapide avec moins de temps passé aux tâches de manipulation.
Données sur le kit de test de potassium FLIPR
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Kits de comparaison pour le potassium
Comparaison des résultats du kit FLIPR Test Potassium aux résultats d’un kit concurrent.
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Comparaison des fenêtres de signal
Comparaison de la plage dynamique du signal entre le kit de test de potassium FLIPR et un kit concurrent. Le contrôle négatif est 4 μM de terfénadine ; le contrôle positif est un tampon. Le Z’ Score pour le kit FLIPR Test Potassium = 0,85 et n = 32 comparé au Z’ Score concurrent = 0,64 et n = 30.
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Inhibition des canaux hERG
Inhibition concentration-dépendante du canal hERG par des composés de référence.
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Optimisation de stimulant de canal hERG
Les cellules ont été incubées avec le colorant et les tampons stimulants ont été ajoutés pendant la détection sur le système Tetra FLIPR. La réaction du signal dépendante de la concentration a été caractérisée sous différentes conditions. Un signal optimal a été obtenu à partir de l’association d’un tampon stimulant composé de 1 mM de Tl+ et de 10 mM de K+ (concentration finale) dilués dans un tampon sans chlorure.
Technologie du kit de test FLIPR Potassium
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Mécanisme des kits de test
Le test exploite la perméabilité du thallium (Tl+) pour les canaux potassiques (K+). Les cellules sont incubées avec une forme éthérisée AM du colorant fluorescent sensible au thallium. Les estérases intracellulaires clivent le groupe AM en capturant le colorant dans les cellules. Les cellules sont ensuite stimulées avec un mélange de K+ et Tl+ ou un ligand en présence de Tl+. L’augmentation du signal fluorescent représente l’influx de Tl+ dans la cellule, plus particulièrement au travers du canal potassique, et devient une mesure de l’activité fonctionnelle de ce canal potassique. Le bruit de fond est atténué par la solution masquante.
Mécanisme des kits de test
Le test exploite la perméabilité du thallium (Tl+) pour les canaux potassiques (K+). Les cellules sont incubées avec une forme éthérisée AM du colorant fluorescent sensible au thallium. Les estérases intracellulaires clivent le groupe AM en capturant le colorant dans les cellules. Les cellules sont ensuite stimulées avec un mélange de K+ et Tl+ ou un ligand en présence de Tl+. L’augmentation du signal fluorescent représente l’influx de Tl+ dans la cellule, plus particulièrement au travers du canal potassique, et devient une mesure de l’activité fonctionnelle de ce canal potassique. Le bruit de fond est atténué par la solution masquante.
Ressources sur le kit de test FLIPR Potassium
Livre électronique
Tests optimisés pour la recherche de pointe
Optimized Assays for Breakthrough Research
La recherche en biologie a été largement simplifiée par les kits de test, instruments et protocoles d’analyse normalisés commercialisés par les fabricants.
Affiche scientifique
Évaluation de puissance in vitro des inhibiteurs de hERG : test de fluorescence sensible au thallium cellulaire comparé à l’électrophysiologie automatisée
In Vitro Potency Assessment of hERG Inhibitors: Cell-Based Thallium-Sensitive Fluorescence Assay vs. Automated Electrophysiology
Consultez cette affiche pour découvrir la performance du test de fluorescence sensible au thallium sur le FLIPR Tetra par rapport à celle obtenue avec des techniques d’enregistrement électrophysiologique…
Note d'application
Caractérisation des inhibiteurs des canaux hERG à l’aide du kit d'essai FLIPR Potassium sur le système FLIPR Tetra
Characterization of hERG channel blockers using the FLIPR Potassium Assay Kit on the FLIPR Tetra System
L’inhibition induite par des médicaments du canal ionique du gène hERG (human ether-à-go-go related gene) a été associée à la sensibilité des patients à la tachyarythmie ventriculaire potentiellement mortelle,…
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Note d'application
Développement d'un essai de transporteur potassium-chlorure cellulaire avec le kit d'essai FLIPR Potassium
Development of a cell-based potassium-chloride transporter assay using the FLIPR Potassium Assay Kit
Le kit d'essai FLIPR Potassium peut être utilisé pour mesurer l’activité fonctionnelle du co-transporteur cation-chlorure hKCC2 en utilisant un protocole homogène sans lavage. Le kit d'essai affiche un…
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Affiche scientifique
Essai de nouveau canal ionique potassique homogène pour le criblage à haut débit
A Novel Homogenous Potassium Ion Channel Assay for High-Throughput Screening
Les canaux ioniques constituent une classe de protéines membranaires qui assurent la médiation du mouvement des ions chargés à travers la membrane cellulaire. Les canaux potassiques constituent le groupe le plus important et le plus divers de…
Publications
L'évaluation des paramètres de battement dans des cellules souches pluripotentes induites humaines permet le criblage quantitatif in vitro pour la cardiotoxicité.
Assessment of Beating Paramaters in Human Induced Pluripotent Stem Cells Enables Quantitative in Vitro Screening for Cadiotoxicity
Les cardiomyocytes dérivés de cellules souches pluripotentes induites (iPSC) humaines sont prometteurs pour le criblage lors du développement précoce de médicaments. Ici, nous avons testé l’hypothèse selon laquelle l’évaluation in vitro de…
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Publications
Évaluation multiparamétrique in vitro des effets de composés sur la physiologie des cardiomyocytes en utilisant des cellules iPSC
Multiparameter In Vitro Assessment of Compound Effects on Cardiomyocyte Physiology Using iPSC Cells
Un pourcentage élevé de médicaments échoue dans les études cliniques en raison de leur toxicité cardiaque ; par conséquent, la mise au point de tests in vitro sensibles permettant d’évaluer les effets indésirables potentiels sur les cardiomyoc…
Développement d’un essai de flux TI+ in vitro pour l’identification d'agonistes du canal potassique
