Kit ScanLater Western Blot
Le kit de test ScanLater™ Western Blot sert à effectuer un test par fluorescence en temps résolu (time-resolved fluorescence ou TRF), idéal pour la quantification d’échantillons contenant seulement quelques femtogrammes de protéine. Grâce à cette nouvelle méthode Western Blot, vous pouvez :
- Détection de la fluorescence en temps résolu
- Anticorps anti-lapin de chèvre marqué à l'europium, anti-souris de chèvre, anti-rat d'âne, anti-chèvre d'âne ou marqués à la streptavidine
- Compatible avec des membranes en nitrocellulose et PVDF
- Excitation à 340/80 nm avec plage d’émission à 616/10 nm
- Optimisé pour une utilisation avec une cartouche de détection ScanLater Western Blot pour les lecteurs multimodes SpectraMax® i3, i3x et Paradigm®.
- Optimisé pour une utilisation avec le module de détection TRF amélioré pour le lecteur de microplaques multimode SpectraMax iD5
- Éliminer certaines étapes d'addition des substrats et gagner du temps.
- Maintenir la stabilité du signal du Western blot pendant au moins un mois
- Améliorer la sensibilité du test avec la méthode TRF pour diminuer le bruit de fond
- Maintient la sensibilité de détection des protéines entre un femtogramme et un picogramme, comme un détecteur Western Blot traditionnel
Données sur le kit de test ScanLater Western Blot
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Stabilité du signal dans le temps
Les résultats démontrent la stabilité du signal du système de test ScanLater. Trois dilutions de transferrine ont été séparées par électrophorèse et transférées sur une membrane Immobilon FL, puis révélées à l'aide d'un anticorps anti-transferrine de lapin. Les transferts ont été incubés avec des anticorps secondaires anti-lapin marqués à l’europium ScanLater. Les membranes ont été mesurées au jour 1 et au jour 30. Les résultats représentent trois séries de dilutions de transferrine dans du tampon pour échantillon 1X chargée sur un gel en gradient de 4 à 20 % durant 30 min. Les protéines ont été transférées sur une membrane Immobilon FL puis sondées avec de l'anti-transferrine de lapin durant la nuit à 4 °C, puis incubées avec de l'IgG anti-lapin marquée à l’europium pendant 1 heure. Les membranes ont été lavées, séchées et analysées le jour même et après un mois avec un lecteur SpectraMax Paradigm.
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Stabilité du signal sur plusieurs balayages
Les résultats démontrent la stabilité du signal des anticorps secondaires marqués à l’europium ScanLater après 7 mesures successives de la même membrane. Cela démontre la stabilité des transferts d'IgG anti-lapin marquée à l’europium après 7 balayages sur le lecteur SpectraMax Paradigm.
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Détection de faibles quantités de la forme phosphorylée endogène de pChk1
Détection de la forme phosphorylée de pChk1 dans des cellules HEK 293 après traitement par le carcinogène MMS et rayonnement UV (Stanford University).
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Détection de faibles quantités de la forme phosphorylée endogène de JNK1
Détection de la forme phosphorylée de JNK1 dans des cellules NHLF (fibroblastes de poumon humain d'origine naturelle) traitées avec des stimulants et des médicaments inhibiteurs.
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Comparaison du système ScanLater Western blot avec la détection par immunotransfert par chimioluminescence
Détection de Rad-18 marqué à l'ubiquitine dans des cellules HEK 293 traitées avec différentes concentrations (0, 50, 100 ppm) du carcinogène MMS, un agent alkylant. Résultats comparables avec le système ScanLater Western blot et la détection western blot par chimiluminescence (université de Stanford).
Technologie du kit de test ScanLater Western Blot
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Durée d’émission de la fluorescence de fond
Représentation schématique des durées d'émission de fluorescence du chélate d'europium illustrant le principe de la mesure TRF. Le signal est mesuré après un laps de temps approprié pour réduire l'auto-fluorescence.
Durée d’émission de la fluorescence de fond
Représentation schématique des durées d'émission de fluorescence du chélate d'europium illustrant le principe de la mesure TRF. Le signal est mesuré après un laps de temps approprié pour réduire l'auto-fluorescence.
Spectres d'excitation et d'émission du chélate d'Europium
Représentation schématique des spectres d’émission et d’excitation du chélate d’europium
Spectres d'excitation et d'émission du chélate d'Europium
Représentation schématique des spectres d’émission et d’excitation du chélate d’europium
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Principe du test ScanLater Western Blot
Le schéma de la méthode de détection protéique montre que l’anticorps secondaire est directement marqué à l’europium.
Principe du test ScanLater Western Blot
Le schéma de la méthode de détection protéique montre que l’anticorps secondaire est directement marqué à l’europium.
Ressources sur le kit de test ScanLater Western Blot
Note d'application
Estimation du poids moléculaire des protéines avec l’échelle protéique ScanLater Western Blot
Estimation of Protein Molecular Weights with ScanLater Western Blot Protein Ladder
L’échelle protéique ScanLater Western Blot est un composant essentiel du système de détection par immunotransfert ScanLater. Les principales applications de cette échelle protéique comprennent…
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Note d'application
Détection et quantification des protéines avec le système de détection ScanLater Western blot
Detection and quantitation of protein with ScanLater Western Blot Detection System
La détection des protéines est actuellement importante en recherche pharmaceutique et clinique, et les Western Blots font partie des méthodes les plus fréquemment employées. Diverses techniques sont…
Fiche technique
Système de détection ScanLater Western blot
ScanLater Western Blot Detection System
Découvrez le système de détection par immunotransfert ScanLater qui inclut la cartouche de détection par immunotransfert ScanLater, le kit d'analyse Western Blot ScanLater, ainsi que l'acquisition d'images.
Livre électronique
Tests optimisés pour la recherche de pointe
Optimized Assays for Breakthrough Research
La recherche en biologie a été largement simplifiée par les kits de test, instruments et protocoles d’analyse normalisés commercialisés par les fabricants.
Affiche scientifique
Détection et quantification de protéines sur Western Blot à l'aide de protéines marquées à l'europium et d'un lecteur de plaques
Western Blot Protein Detection and Quantitation Based on Europium Labeled Proteins Using a Plate Reader
Parcourez le PDF pour en savoir plus sur le système Western Blot SpectraMax, une plateforme simple, sensible et stable qui offre une excellente capacité Western Blot dans un lecteur de microplaques.
Produits et services compatibles avec le kit de test ScanLater Western Blot
Applications particulières
Durée d’émission de la fluorescence de fond
Représentation schématique des durées d'émission de la fluorescence de fond et du chélate d'Europium illustrant…
Spectres d'excitation et d'émission du chélate d'Europium
Représentation schématique des spectres d’émission et d’excitation du chélate d’europium
Principe du test ScanLater Western Blot
Le schéma de la méthode de détection protéique montre que l'anticorps secondaire est directement marqué à…