Production d'anticorps monoclonaux
La production traditionnelle d’anticorps monoclonaux (mAb) commence généralement par la génération de cellules productrices de mAb (c’est-à-dire des hybridomes) en fusionnant des cellules de myélome avec les splénocytes producteurs d’anticorps souhaités (p. ex., lymphocytes B). Ces cellules B sont habituellement extraites d’animaux, généralement de souris. Après la fusion cellulaire, un grand nombre de clones est criblé et sélectionné en fonction de la spécificité de l’antigène et de la classe d’immunoglobuline. Une fois les lignées cellulaires d’hybridome candidates identifiées, chaque « correspondance » est confirmée, validée et caractérisée à l’aide de plusieurs tests de fonctionnalité en aval. Cette étape terminée, les clones sont cultivés à grande échelle à l'aide de bioprocédés supplémentaires.
Un processus typique de production d'anticorps monoclonaux.
Processus typique de production d’anticorps monoclonaux
- Immunisation des souris et isolement des splénocytes : les souris sont immunisées avec un antigène, puis la production d’anticorps est recherchée dans leur sang. Les splénocytes produisant des anticorps sont ensuite isolés pour la production d’hybridomes in vitro.
- Préparation des cellules de myélome : les cellules de myélome sont des cellules immortalisées qui, une fois fusionnées avec des cellules de rate, peuvent produire un hybridome capable de croissance illimitée. Les cellules de myélome sont préparées pour la fusion.
- Fusion : les cellules de myélome et les splénocytes isolés sont fusionnés pour former des hybridomes en présence de polyéthylène glycol (PEG), ce qui permet la fusion des membranes cellulaires.
- Criblage et sélection de clones : les clones sont criblés et sélectionnés en fonction de la spécificité de l’antigène et de la classe d’immunoglobuline.
- Caractérisation fonctionnelle : confirmer, valider et caractériser (p. ex., ELISA) chaque colonie permettant potentiellement une production élevée.
- Extrapolation et sevrage : extrapoler les clones produisant les anticorps souhaités et sevrer le ou les agents de sélection.
- Expansion : développer les clones produisant les anticorps souhaités (p. ex., bioréacteurs ou flacons de grande taille).
Pour plus d'informations, veuillez télécharger notre eBook, « Sélectionnez des lignées cellulaires de grande valeur de manière professionnelle ».
Autres liens :