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Cartouche de détection ScanLater pour Western Blot

Transformez votre système SpectraMax i3x ou SpectraMax Paradigm en lecteur western blot

Vous avez de nombreux western blots. Et vous pouvez désormais les analyser en utilisant notre technologie optique avancée déjà présente dans votre laboratoire avec votre lecteur de microplaques. Le système de détection ScanLater™ Western blot inclut la cartouche de détection ScanLater Western Blot, le kit de test ScanLater Western Blot, ainsi que l'acquisition d'image associée au logiciel SoftMax® Pro. En quelques minutes seulement, vous pouvez installer la cartouche de détection ScanLater Western Blot avec le SpectraMax® i3x ou SpectraMax ® Paradigm® afin de vous permettre de detecter et d'analyser vos blots, au lieu d'investir dans un système dédié. Visualisez plus de données et accomplissez plus de tâches avec votre lecteur de microplaques.

La cartouche de détection ScanLater Western Blot est une option que vous pouvez installer pour les plate-formes multimode SpectraMax i3x et SpectraMax Paradigm Grâce à cette nouvelle technologie, vous pouvez :

  • Ajouter la détection Western blot au lecteur de microplaques en 2 minutes
  • Éliminer certaines étapes d'addition des substrats et gagner du temps.
  • Maintenir une sensibilité protéique du femtogramme au picogramme comparable aux méthodes western blot traditionnelles
  • Maintenir la stabilité du signal du blot jusqu'à 30 jours
  • Utiliser une plate-forme logicielle SoftMax Pro unique pour exécuter à la fois des tests de détection de microplaques et Western blot

Caractéristiques :

  • Cartouche installable par l'utilisateur pour les plate-formes multimode SpectraMax i3 et Paradigm.
  • Détection de la fluorescence en temps résolu
  • Source d'excitation à lampe flash Xenon
    • Gamme d'excitation 340/80 nm
    • Gamme d'émission 616/10 nm
  • Compatible avec des membranes en nitrocellulose et PVDF
  • Compatible avec des anticorps de chèvre anti-lapin, anti-souris ou marqués à la streptavidine
  • Lecture de membranes adaptée au support de membrane ScanLater SpectraMax

 

Figure 1 -

Flux de travail du test ScanLater™ Western Blot

 

Flux de travail du test Scanlater Western Blot
Figure 1 - Le système ScanLater simplifie le protocole western blot traditionnel en employant un anticorps secondaire libellé avec un chélate d'europium. Le blot est ensuite lu en utilisant la cartouche ScanLater Western Blot sur les plate-formes multimode SpectraMax® i3 ou Paradigm. Aucun substrat n'est nécessaire et le blot peut être analysé immédiatement après lavage.

 

Figure 2 -

Principe du test ScanLater Western Blot

 

Principe du test Scanlater Western Blot
Figure 2. Le schéma de la méthode de détection protéique montre que l'anticorps secondaire est directement marqué à l'Europium.

 

Figure 3 -

Excitation du chélate d'Europium et spectre d'émission

 

Excitation du chélate d'europium et spectre d'émission

 

Figure 4 -

Représentation schématique des durées d'émission réduisant le bruit de fond en fluorescence

 

Représentation schématique des durées d'émission
Figure 4. Représentation schématique des durées de vie de la fluorescence résiduelle et du chélate d'europium illustrant le principe de la mesure TRF. Le signal est mesuré après un laps de temps approprié pour réduire l'auto-fluorescence.

 

Applications représentatives : 

  • Identification et quantification de protéines
  • Cartographie d'épitopes
  • Analyse de la composition et de la séquence en acides aminés
  • Impression de points
  • Expression endogène ou exogène de phosphoprotéines
  • Résilience de protéines
  • Analyse de domaines structurels
  • Expression de protéines
  • Teneur en protéines dans le sérum
  • Élimination QC d'albumine et lgG dans le sérum
  • Expression de protéine dans le cycle cellulaire

Sensibilité et gamme dynamique du système ScanLater Western blot

Sensibilité et gamme dynamique du système Scanlater Western Blot
Figure 1 - Image de série de dilutions de gluthathion S-transférase analysée par le lecteur SpectraMax Paradigm. Note : une échelle de rendu à fausses couleurs est utilisée pour illustrer l'étendue de la gamme dynamique. Intensités intégrées à partir de bandes individuelles montrant une gamme dynamique totale supérieure à 3 logarithmes décimaux.

 

Comparaison du système ScanLater Western blot avec la détection western blot par chimiluminescence

 

Système ScanLater Western Blot, détection Western Blot par chimiluminescence
Figure 2 - Détection de Rad-18 marqué à l'ubiquitine dans des cellules HEK 293 traitées avec différentes concentrations (0, 50, 100 ppm) du carcinogène MMS, un agent d'alkylation. Résultats comparables avec le système ScanLater Western blot et la détection western blot par chimiluminescence (université de Stanford).

La cartouche de détection ScanLater Western Blot est compatible avec les plateformes de détection multi-mode SpectraMax i3 et SpectraMax Paradigm. Pour plus d'informations, cliquez sur le lien Tableau comparatif des lecteurs de microplaques multimode de Molecular Devices.

Nom du produit Description Numéro de référence
Système
de Détection Western Blot 
ScanLater
  • Support d'échantillon de membrane
  • Logiciel SoftMax Pro 6.3.1
  • Module d'extension d'imagerie pour l'analyse de données
0200-7027
Kit
ScanLater : Streptavidine Europium
Kit d'évaluation
  • Streptavidine marquée à l'europium (20 μg)
  • Tampon de blocage (40 ml)
  • Tampon de lavage (100 ml)
  • Pour 10 mini-gels avec protocole recommandé
R8200

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Kit
ScanLater : Streptavidine Europium
Kit en vrac
  • Streptavidine marquée à l'europium (60 μg)
  • Tampon de blocage (120 ml)
  • Tampon de lavage (300 ml)
  • Pour 30 mini-gels avec protocole recommandé
R8203

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Kit
ScanLater : Anti-souris
Kit d'évaluation
  • Anticorps anti-souris de chèvre marqué à l'europium (20 μg)
  • Tampon de blocage (40 ml)
  • Tampon de lavage (100 ml)
  • Pour 10 mini-gels avec protocole recommandé
R8201

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Kit
ScanLater : Anti-souris
Kit en vrac
  • Anticorps anti-souris de chèvre marqué à l'europium (60 μg)
  • Tampon de blocage (120 ml)
  • Tampon de lavage (300 ml)
  • Pour 30 mini-gels avec protocole recommandé
R8205

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Kit
ScanLater : Anti-lapin
Kit d'évaluation
  • Anticorps anti-lapin de chèvre marqué à l'Europium (20 μg)
  • Tampon de blocage (40 ml)
  • Tampon de lavage (100 ml)
  • Pour 10 mini-gels avec protocole recommandé
R8202

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Kit
ScanLater : Anti-lapin
Kit en vrac
  • Anticorps anti-lapin de chèvre marqué à l'Europium (60 μg)
  • Tampon de blocage (120 ml), tampon de lavage (300 ml)
  • Pour 30 mini-gels avec protocole recommandé
R8204

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Kit
ScanLater : Anti-chèvre
Kit d'évaluation
  • Anticorps d'âne anti-chèvre marqué à l'Europium (20 μg)
  • Tampon de blocage (40 ml)
  • Tampon de lavage (100 ml)
  • Pour 10 mini-gels avec protocole recommandé
R8224

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Kit
ScanLater : Anti-chèvre
Kit en vrac
  • Anticorps d'âne anti-chèvre marqué à l'Europium (60 μg)
  • Tampon de blocage (120 ml)
  • Tampon de lavage (300 ml)
  • Pour 30 mini-gels avec protocole recommandé
R8227

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Kit
ScanLater : Anti-rat
Kit d'évaluation
  • Anticorps d'âne anti-rat marqué à l'Europium (20 μg)
  • Tampon de blocage (40 ml)
  • Tampon de lavage (100 ml)
  • Pour 10 mini-gels avec protocole recommandé
R8225

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Kit
ScanLater : Anti-rat
Kit en vrac
  • Anticorps d'âne anti-rat marqué à l'Europium (60 μg)
  • Tampon de blocage (120 ml)
  • Tampon de lavage (300 ml)
  • Pour 30 mini-gels avec protocole recommandé
R8228

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Échelle protéique
Échelle protéique ScanLater Western Blot
  • 7 protéines recombinantes biotinylées à 10, 20, 40, 60, 80, 100 et 140 kD
  • 3 protéines indicatrices précolorées à 18, 31 et 70 kD
  • Prêt à l'emploi, pour 30 mini gels avec un protocole
    recommandé
R8220

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Composants des kits
Tampon de lavage ScanLater (100 ml) R8206
Tampon de blocage ScanLater 5x (120 ml) R8207
Anticorps de chèvre anti-souris marqué à l'Eu ScanLater (60 μg) R8208
Anticorps de chèvre anti-lapin marqué à l'Eu ScanLater (60 μg) R8209
Anticorps marqué à l'Eu - Streptavidine ScanLater (60 µg) R8212
IgG anti-chèvre Eu ScanLater (60 µg) R8226