Qu’est-ce que l’absorbance ?

L’absorbance (A), également appelée densité optique (DO), est la quantité de lumière absorbée par une solution. La transmittance est la quantité de lumière traversant une solution. L’absorbance et la transmittance en % sont souvent utilisées en spectrophotométrie et peuvent s’exprimer de la façon suivante :

Équation d’absorbance

A = Log10 (I0/I)

où I0 est l’intensité de la lumière incidente, et I est l’intensité de cette lumière après qu’elle a traversé l’échantillon

T = I/I0 et T% = 100 (T)

L’équation qui permet de calculer l’absorbance à partir de la transmittance en % est

A = 2 - log10 (T%)
 

 

Déterminer la concentration en utilisant la loi de Beer-Lambert

La concentration d’un échantillon peut être calculée à partir de son absorbance en utilisant la loi de Beer-Lambert, qui s’exprime de la façon suivante :

A = ε * c * p

Où ε est l’absorptivité molaire, ou coefficient d’extinction molaire, en l mol-1 cm-1
c est la concentration du soluté dans la solution, en mol/l
p est le trajet optique de l’échantillon, en cm, par exemple, 1 cm pour une cuvette

 

Absorbance-illustration

Les mesures d’ultraviolets (UV) dans les microplaques sont devenues possibles lorsque Molecular Devices a introduit le premier lecteur de microplaques pouvant détecter les UV. Depuis, les mesures de l’ADN, de l’ARN et des protéines dans des microplaques sont devenues très populaires. En savoir plus sur la mesure de l’absorbance et sur certaines applications clés qui utilisent l’absorbance.

 

Ressources sur l’absorbance

Produits associés à l’absorbance