Développement de lignées cellulaires




Développement de lignées cellulaires

Les lignées cellulaires stables sont largement utilisées dans de nombreuses applications importantes, notamment la production de molécules biologiques (par ex. protéines recombinantes, anticorps monoclonaux), le criblage de médicaments et les études fonctionnelles de gènes. Le processus de développement de lignées cellulaires stables commence souvent par la transfection de cellules hôtes sélectionnées, en général CHO ou HEK 293, avec les plasmides souhaités. Après la transfection, les chercheurs criblent et quantifient les clones à niveau d'expression élevé. Une fois ces producteurs importants identifiés, les lignées cellulaires et/ou les protéines produites par les cellules sont validées. The manual screening methods traditionally used for cell line development are time-consuming and labor-intensive, creating a great demand for high throughput, automated solutions for such efforts.

  • Tri de cellules uniques

    Pour développer des lignées cellulaires, il faut découvrir des clones cellulaires uniques produisant des taux élevés et constants de la protéine thérapeutique cible. La première étape du processus est l’isolation des cellules uniques viables. Limiting dilution is a technique that relies on statistical probability but is time consuming. L’imprimante CloneSelect Single-Cell Printer permet d’isoler facilement les cellules de façon à optimiser la viabilité cellulaire, tout en fournissant des preuves directes de clonalité par le biais de séries de cinq images capturées durant la distribution des cellules.

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    Viabilité cellulaire

    Pour développer des lignées cellulaires, il faut découvrir des clones cellulaires uniques produisant des taux élevés et constants de la protéine thérapeutique cible. Une première étape essentielle du processus consiste à isoler des cellules viables uniques. Single cells proliferate to form colonies that can then be assessed for productivity of the target therapeutic protein. La viabilité et les taux de croissance des clones cellulaires uniques peuvent être déterminés sur le CloneSelect Imager.

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  • Assurance de monoclonalité

    Le développement de lignées cellulaires et la garantie de monoclonalité constituent des étapes essentielles du processus de création de molécules biopharmaceutiques, telles que les anticorps monoclonaux. Une lignée cellulaire peut être établie après l’isolation d’une cellule viable unique exprimant fortement la protéine d’intérêt. La documentation de preuves de clonalité est l’une des étapes clés de ce processus. Cette preuve de clonalité est généralement documentée à partir d'images, où une image d’une cellule unique est générée et inclue dans les déclarations réglementaires.

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    Clone productivity screening and titer

    Un élément important de l’identification des clones de valeur est la détermination de la productivité de colonies dérivées de cellules uniques. Screening for productivity using traditional approaches is laborious and time consuming, generally consisting of a multistep process that involves isolating single cells from limiting dilution followed by assessment of titer using ELISA. The ClonePix 2 System combines single-cell isolation and productivity screening into a single step, resulting in dramatically shorter screening times and increased number of candidates. The high throughput Octet systems on the other hand provides a method for the rapid determination of titer that also dramatically shortens screening times.

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  • Criblage d’expression de surface cellulaire

    De nombreuses protéines s’exprimant à la surface des cellules sont des cibles pour la découverte et le développement de produits biopharmaceutiques. Par exemple, les récepteurs couplés aux protéines G (GPCR) constituent la plus grande classe de protéines de surface cellulaire et sont des cibles pour pratiquement 40 % des médicaments existants. La détection et la sélection de clones de surface cellulaire de valeur à partir d’un pool de cellules transfectées peut s’avérer un processus complexe. Le système ClonePix 2 est une méthode automatisée pour le criblage de vastes populations de cellules, augmentant ainsi la probabilité de découvrir un liant de haute affinité rare ou un producteur élevé.

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    Glycosylation profiling

    Glycosylation is an important post-translational modification of biologics drug molecules during production that often has significant impact on product performance and variability. It can affect both safety and efficacy of the biologics molecules hence should be monitored during the screening and selection of these biologics.

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Ressources sur le développement de lignées cellulaires

Produits et services connexes du développement de lignées cellulaires

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