Anticorps monoclonaux (mAb)

Développement de lignées cellulaires

Le développement de lignées cellulaires est une étape essentielle du processus de génération de molécules biopharmaceutiques, telles que les anticorps monoclonaux. Le processus commence souvent par la transfection du type de cellule hôte avec l’ADN codant pour la protéine thérapeutique d’intérêt, ce qui permet une intégration aléatoire ou dirigée de l’ADN cible dans le génome de la cellule hôte. Des milliers de clones sont criblés pour isoler les cellules rares qui présentent une productivité élevée, ce qui est un processus manuel fastidieux.

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Comparaison de méthodes de clonage classique par rapport à f.sight

Dans cette étude, nous avons conduit six ensembles d’expériences, en clonant deux lignées cellulaires CHO avec des milieux de culture cellulaire et des compléments sans composant d’origine animale (ACF), et nous avons comparé la performance d’un instrument CloneSelect Single-Cell Printer à celle de deux autres méthodes de clonage acceptées (FC et LD).

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Identification en toute confiance de cellules CHO-S monoclonales

La culture des cellules CHO dans CloneMedia CHO Growth A constitue une façon plus efficace de cloner des cellules CHO que la réalisation d’une dilution limitante dans un milieu liquide. Le milieu semi-solide immobilise les cellules, ce qui les empêche de se déplacer pendant la manipulation de routine. Cela permet aux chercheurs de suivre en toute confiance la croissance d’une seule cellule dans une colonie.

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eBook : Optimisez vos lignées cellulaires de grand intérêt

Dans ce livre électronique, nous présentons le flux de travail de développement de lignées cellulaires, ainsi que des solutions haut début pour accélérer le processus et permettre une sélection plus facile et plus rapide des lignées cellulaires de mammifère à productivité élevée.

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Développement amélioré d’hybridomes spécifiques d’un virus

Les virus à ADN double brin (ADNdb) provoquent de nombreuses maladies chez l’homme. Les espèces de l’ordre de Herpesvirus et les familles Adénovirus et Papillomavirus peuvent causer des symptômes chez l’homme avec des tableaux cliniques similaires. En outre, la confirmation du diagnostic au niveau sérologique ou protéique pour un virus particulier peut être compliquée en raison de la conservation des antigènes dans les génomes viraux. Un degré élevé d’homologie protéomique et des réactions croisées dans le sérum conduisent à une différenciation médiocre entre les espèces individuelles de virus à ADNdb. L’objectif de la recherche était d’identifier une lignée cellulaire à productivité optimale sécrétant un anticorps monoclonal hautement spécifique ne causant pas de réaction croisée pouvant être utilisée dans le développement d’agents biothérapeutiques.

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Sélection d’hybridomes à l’aide d’un milieu HAT

La sélection d'hybridomes après la fusion des myélomes et des cellules de rate est une étape critique dans la production d'anticorps monoclonaux. Souvent, les chercheurs utilisent la méthode HAT (hypoxanthine-aminoptérine-thymidine) pour accomplir cette tâche.

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Technologie d’hybridome

La technologie des hybridomes est une méthode de production en masse d’anticorps dans une lignée cellulaire hybride générée à partir de la fusion de lymphocytes B produisant des anticorps avec une lignée cellulaire de myélome immortalisée, que l’on appelle à présent cellule d'hybridome. Comme chaque lymphocyte B produit un anticorps unique, le clonage de cellule unique d'hybridomes peut être utilisé pour générer une bibliothèque diversifiée d’anticorps monoclonaux uniques à grande échelle, lesquels sont très fréquemment utilisés dans la prévention, le diagnostic et le traitement des maladies.

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Monoclonalité

Le développement de lignées cellulaires et l’assurance de la monoclonalité constituent des étapes essentielles du processus de génération de molécules biopharmaceutiques, telles que les anticorps monoclonaux. Une lignée cellulaire peut être établie après l’isolation d’une cellule viable unique exprimant fortement la protéine d’intérêt. La documentation de preuves de clonalité est l’une des étapes clés de ce processus. Cette preuve de clonalité est généralement documentée à partir d'images, où une image d’une cellule unique est générée et inclue dans les déclarations réglementaires.

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Phage Display

L'affichage de phage est une technique utilisée pour étudier l’interaction des protéines qui s’affichent à la surface d’un bactériophage avec d’autres molécules telles que des peptides, de l’ADN et d’autres protéines. L'affichage de phage est couramment utilisé pour détecter les interactions de haute affinité entre les anticorps et les antigènes, lesquels jouent un rôle essentiel dans la pathogenèse virale, les vaccins et d’autres traitements.

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préparation et ensemencement de cellules dans un milieu semi-solide

La mise en plaque des cellules dans le milieu semi-solide visqueux peut être difficile pour les utilisateurs non expérimentés. Regardez notre tutoriel de 4 minutes pour quelques conseils sur la façon d’étaler plus efficacement les cellules dans ce milieu.

Regardez le tutoriel vidéo