Anticorps monoclonaux (mAb)
Détection d’anticorps monoclonaux (mAb)
Les anticorps monoclonaux (mAb) sont issus d’une cellule parent unique et ne se lient donc qu’à un seul épitope. La détection d’anticorps monoclonaux renvoie généralement au criblage et à l’identification d’anticorps spécifiques qui ciblent un épitope spécifique pour le diagnostic et le traitement de maladies, comme le coronavirus pour la COVID-19.
Il existe plusieurs méthodes pour générer des mAb thérapeutiques. Deux des méthodes de production les plus courantes sont les hybridomes et l'affichage de phage.
Production de mAb à l’aide d’hybridomes
Dans cette méthode, les scientifiques fusionnent des cellules de myélome immortalisées avec des splénocytes obtenus chez des animaux préalablement exposés à l’antigène d’intérêt. La cellule fusionnée qui en résulte est appelée un hybridome. L’avantage d’un hybridome est qu’il possède la capacité de produire des mAb tout en se divisant indéfiniment, alors que les splénocytes ont une durée de vie limitée. Les chercheurs criblent ensuite des centaines d’hybridomes afin identifier les meilleurs d’entre eux en fonction de la spécificité de l’antigène et la classe d’immunoglobuline. Ces candidats sont par la suite analysés, caractérisés et cultivés à grande échelle pour des procédés ultérieurs.
Production de mAb par affichage de phage
Dans cette méthode, les gènes variables des chaînes lourdes et légères d’un anticorps sont introduits dans un gène codant pour une des protéines de l’enveloppe du bactériophage. Ainsi, les phages exprimeront les gènes de l'anticorps et cet anticorps sera exposé à la surface du phage. Grâce à cette stratégie, les chercheurs peuvent créer une banque présentant des millions d’anticorps différents. Ces phages présentant l’anticorps sont ensuite criblés contre l’antigène d’intérêt, et ceux qui sont hautement spécifiques sont identifiés, isolés puis caractérisés de manière encore plus précise pour leur utilisation lors de travaux ultérieurs.
Comment les anticorps monoclonaux sont-ils produits ?
La production traditionnelle d’anticorps monoclonaux commence généralement par la génération de cellules productrices de mAb (c'est-à-dire des hybridomes) en fusionnant des cellules de myélome avec les splénocytes producteurs d’anticorps souhaités (par ex., des cellules B). Ces cellules B sont habituellement extraites d’animaux, généralement de souris. Après la fusion cellulaire, un grand nombre de clones est criblé et sélectionné en fonction de la spécificité de l’antigène et de la classe d’immunoglobuline. Une fois les lignées cellulaires d'hybridome candidates identifiées, chaque « correspondance » est reconfirmée, validée et caractérisée à l’aide de plusieurs tests de fonctionnalité en aval. Cette étape terminée, les clones sont cultivés à grande échelle à l'aide de bioprocédés supplémentaires.
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