Production d'anticorps monoclonaux
Techniques de culture d’anticorps de haute spécificité à partir de lignées cellulaires
Comment les anticorps monoclonaux sont-ils produits ?
La production traditionnelle d’anticorps monoclonaux (mAb) commence généralement par la génération de cellules productrices de mAb (c’est-à-dire des hybridomes) en fusionnant des cellules de myélome avec les splénocytes producteurs d’anticorps souhaités (p. ex., lymphocytes B). Ces cellules B sont habituellement extraites d’animaux, généralement de souris. Après la fusion cellulaire, un grand nombre de clones est criblé et sélectionné en fonction de la spécificité de l’antigène et de la classe d’immunoglobuline. Une fois les lignées cellulaires d’hybridome candidates identifiées, chaque « correspondance » est confirmée, validée et caractérisée à l’aide de plusieurs tests de fonctionnalité en aval. Cette étape terminée, les clones sont cultivés à grande échelle à l'aide de bioprocédés supplémentaires.
Un processus typique de production d'anticorps monoclonaux.
- Immunisation des souris et isolation des splénocytes : les souris sont immunisées avec un antigène, puis la production d’anticorps est recherchée dans leur sang. Les splénocytes produisant des anticorps sont ensuite isolés pour la production d’hybridomes in vitro.
- Préparation des cellules de myélome : les cellules de myélome sont des cellules immortalisées qui, une fois fusionnées avec des cellules de rate, peuvent produire un hybridome capable de croissance illimitée. Les cellules de myélome sont préparées pour la fusion.
- Fusion : les cellules de myélome et les splénocytes isolés sont fusionnés pour former des hybridomes en présence de polyéthylène glycol (PEG), ce qui permet la fusion des membranes cellulaires.
- Criblage et sélection de clones : les clones sont criblés et sélectionnés en fonction de la spécificité de l’antigène et de la classe d’immunoglobuline.
- Caractérisation fonctionnelle : confirmer, valider et caractériser (p. ex., ELISA) chaque colonie permettant potentiellement une production élevée.
- Extrapolation et sevrage : extrapoler les clones produisant les anticorps souhaités et sevrer le ou les agents de sélection.
- Expansion : développer les clones produisant les anticorps souhaités (p. ex., bioréacteurs ou flacons de grande taille).
Un processus typique de production d'anticorps monoclonaux.
Production d’anticorps monoclonaux vs polyclonaux
La compréhension de la production d’anticorps monoclonaux vs polyclonaux révèle des méthodes distinctes dans le domaine de la recherche biotechnologique et pharmaceutique pour la création d’anticorps. La production d’anticorps monoclonaux implique un processus détaillé qui commence par la création d’hybridomes et conduit à la génération d’anticorps spécifiques. Cette méthode contraste avec la production d’anticorps polyclonaux, où des animaux comme des lapins ou des chèvres sont immunisés pour produire des anticorps purifiés à partir du sérum. Les techniques monoclonales mettent l’accent sur la spécificité et la reproductibilité par la sélection et la mise à l’échelle de clones de lymphocytes B particuliers. En revanche, les méthodes polyclonales offrent une production rapide et économique, bien que produisant une variété d’anticorps avec des spécificités différentes. Cette introduction compare le développement, les avantages et les utilisations de ces outils biotechnologiques essentiels dans les applications thérapeutiques et diagnostiques.
Solution de flux de travail pour la production de mAb
Le développement d’anticorps monoclonaux représente une avancée essentielle dans le domaine de la science biomédicale en offrant des traitements ciblés pour un grand nombre de maladies, notamment le cancer, les maladies auto-immunes et les maladies infectieuses. Ce processus implique la création d’anticorps identiques et dérivés d’une lignée cellulaire unique, garantissant ainsi une spécificité et une efficacité élevées dans les applications thérapeutiques.
La production de mAb utilise des technologies et des méthodologies de pointe pour concevoir des anticorps pouvant cibler et neutraliser avec précision les agents pathogènes. Son rôle étant essentiel dans le développement de thérapies ciblées, la production de mAb améliore l’efficacité des traitements et minimise les effets secondaires par rapport aux approches traditionnelles. Son importance dans la recherche médicale et les soins des patients ne cesse de croître, et reflète son rôle dans l’amélioration des résultats en matière de santé et de la médecine personnalisée.
Application mAb et ressources associées
Explorez nos ressources pour découvrir comment nos technologies avancées simplifient le processus de développement d’anticorps monoclonaux. Découvrez les avantages des flux de travail optimisés et de l’assurance de monoclonalité précise, ainsi que la manière dont ils peuvent révolutionner vos recherches.
Processus du flux de travail pour la production d’anticorps monoclonaux
Découvrez le processus précis de production d’anticorps monoclonaux, de la vaccination à l’expansion évolutive de clones.
Solution de flux de travail pour la production de mAb
Immunisation et isolation des splénocytes
Dans le processus de production d’anticorps monoclonaux, les souris sont immunisées avec des antigènes, et leurs splénocytes producteurs d’anticorps sont isolés pour la production d’hybridomes in vitro.
Préparation de cellules de myélome
Les cellules de myélome sont des cellules immortalisées qui, une fois fusionnées avec des cellules de rate, peuvent produire un hybridome capable de croissance illimitée. Les cellules de myélome sont préparées pour la fusion.
Fusion pour la formation d’hybridomes
La fusion de cellules de myélome avec des splénocytes isolés, en utilisant du polyéthylène glycol (PEG), est une étape clé dans la formation d’hybridomes, qui fait progresser le processus de production d’anticorps monoclonaux.
Système de sélection de colonies de mammifères avec assurance de monoclonalité
Notre système de sélection de colonies 2 ClonePix amélioré avec capacité d’imagerie de cellules uniques haute résolution au jour 0, peut identifier et sélectionner des clones monoclonaux à haute production en une seule étape facile, fusionnant ainsi le criblage haut débit avec l’assurance de monoclonalité pour une efficacité inégalée.
Criblage et sélection des clones
Les clones sont minutieusement criblés et sélectionnés en fonction de leur spécificité antigénique et de leur classe d’immunoglobuline pour garantir que seuls les candidats les plus prometteurs passent à l’étape suivante.
Caractérisation fonctionnelle des clones
Cette étape implique la confirmation, la validation et la caractérisation rigoureuses de chaque clone, en utilisant des techniques telles qu’ELISA pour identifier ceux qui ont le plus haut potentiel de production.
Lecteur de microplaques et système d’imagerie cellulaire
Il est essentiel de faciliter une évaluation automatisée et précise de la viabilité et de la productivité des clones pour faire passer les anticorps les plus efficaces à l’étape suivante.
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Système automatisé de culture cellulaire CellXpress.ai
Améliore significativement les phases d’extrapolation et d’expansion en automatisant la croissance des clones à haut rendement, garantissant ainsi une transition facile de la production en laboratoire à la production à grande échelle sans compromettre la qualité ou la spécificité.
Extrapolation et sevrage
Une fois que les clones sont jugés appropriés, ils subissent un processus d’extrapolation pour augmenter la production d’anticorps, suivi d’une phase de sevrage pour réduire la dépendance aux agents de sélection.
Expansion
La production des anticorps souhaités est amplifiée davantage, souvent dans des bioréacteurs ou de grands flacons, pour répondre à la demande des applications thérapeutiques.
Automatisation des séquences de travail
Nous proposons des cellules de travail évolutives prêtes à être automatisées, allant du niveau d’entrée de gamme au niveau avancé, qui peuvent être personnalisées pour répondre à vos besoins de recherche spécifiques
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