Génération d’hybridomes et criblage de vastes bibliothèques d’anticorps
La technologie des hybridomes est une méthode de production en masse d’anticorps dans une lignée cellulaire hybride générée à partir de la fusion de lymphocytes B produisant des anticorps avec une lignée cellulaire de myélome immortalisée, que l’on appelle à présent cellule d'hybridome. Comme chaque lymphocyte B produit un anticorps unique, le clonage des cellules uniques des hybridomes peut être utilisé pour générer une bibliothèque diversifiée d’anticorps monoclonaux uniques à grande échelle, lesquels sont très fréquemment utilisés dans la prévention, le diagnostic et le traitement des maladies.
Dans cette vidéo, Justin Dranschak, responsable des plateformes BioPharma, présente notre solution de flux de travail sur les hybridomes et mentionne les systèmes permettant de vous aider dans vos recherches.
Protocole sur les hybridomes
Étape 1 : Fusion
Le procédé de fusion des lymphocytes B, exprimant des anticorps uniques, avec des cellules de myélome créant une lignée cellulaire hybride est appelé hybridome.
Étape 2 : Criblage de clones
Identification de lignées cellulaires d’hybridome dérivées d'un clonage qui produisent de grandes quantités d’anticorps monoclonaux.
Étape 3 : Croissance cellulaire
La croissance cellulaire est déterminée en surveillant les divisions cellulaires sur une période donnée au moyen de l’imagerie sans marquage.
Étape 4 : Spécificité et réaction croisée
Processus d’analyse de la capacité d’un anticorps à se lier à un seul antigène cible.
Étape 5 : Affinité de liaison et internalisation
L’affinité de liaison est la force de l’interaction de liaison entre une biomolécule unique (p. ex., protéine ou ADN) et son ligand/partenaire de fixation (p. ex., médicament ou inhibiteur). L’internalisation est le processus de surveillance de la capacité d’une particule donnée à pénétrer dans la cellule.
Systèmes pour accélérer vos recherches sur la COVID-19
Soyez prêt·e plus rapidement grâce à des technologies éprouvées
Molecular Devices peut répondre à vos besoins de recherche en vous proposant rapidement des technologies et solutions grâce à un traitement et une expédition rapides et si nécessaire des solutions de financement personnalisées pour les lecteurs de microplaques, ainsi que les systèmes biopharmaceutiques et d’imagerie cellulaire.
Nos systèmes ImageXpress offrent une solution complète pour l’analyse et le criblage haut contenu. Tous nos systèmes prennent en charge une large plage d’applications et offrent un débit élevé et des flux de travail optimisés.
Nos lecteurs de microplaques de la série SpectraMax® mesurent l'absorbance, la fluorescence et la luminescence, plus d’autres modes de détection avec des mises à niveau disponibles pour le Western Blot, l'imagerie cellulaire, la cinétique rapide avec injecteurs. Les laboratoires BPL/BPF peuvent satisfaire aux directives de la FDA grâce à notre solution de validation et de mise en conformité SoftMax Pro GxP.
Le logiciel SoftMax® Pro 7.1.1 GxP est le tout dernier logiciel le plus sécurisé permettant de respecter entièrement la norme FDA 21 CFR Part 11 grâce à des flux de travail simplifiés qui garantissent l’intégrité des données. Chaque étape est optimisée pour simplifier l’analyse et établir les rapports dans la gestion de nos lecteurs de microplaques.
Les systèmes de repiquage de colonies microbiennes QPix™ 400 Series associent l’analyse intelligente des images à une automatisation précise pour un criblage rapide et efficace de grandes bibliothèques. Pouvant repiquer jusqu’à 3000 colonies par heure, il optimise votre flux de travail.
Le système de repiquage de colonies de cellules de mammifères ClonePix™ 2 est un système totalement automatisé de sélection de clones de haute valeur utilisé dans la découverte d’anticorps et le développement de lignées cellulaires.
La série d’imprimantes CloneSelect™ Single-Cell Printer™ dépose des cellules uniques avec précaution et haut rendement grâce à une cartouche jetable à distributionunidirectionnelle, style jet d’encre, brevetée.
CloneSelect™ Imager est une solution d’imagerie haut débit automatisée destinée à l’imagerie et à l’analyse des cellules de mammifères.
Nos laveurs proposent des options de vitesse et de configuration, allant de la distribution de tube unique au lavage intégral de microplaques à 96 et à 384 puits.
Solutions de recherche liées à la COVID-19
Accélérez vos recherches sur la COVID-19
Molecular Devices s’engage à vous soutenir dans vos recherches sur les réponses cellulaires à la COVID-19 et le développement d’un vaccin en vous proposant des technologies et solutions que vous pouvez déployer rapidement.
Solutions de flux de travail pour le développement d’un vaccin
Afficher divers flux de travail concernant les virus, de la découverte d’antigènes/immunogènes et d’anticorps au développement de lignées cellulaires stables.
Applications pour les recherches essentielles
Découvrez comment notre technologie peut vous aider dans vos recherches sur la COVID-19 et d’autres maladies infectieuses pour le développement de vaccins, la thérapeutique et les diagnostics.
Message de l’entreprise
Alors que la COVID-19 continue de sévir dans le monde entier, nous souhaitons nous assurer que vous savez comment Molecular Devices et Danaher continuent de vous accompagner durant cette période difficile.
Ressources relatives aux réponses cellulaires à la COVID-19 et au développement de vaccin
Note d'application
Flux de travail d’imagerie sur microplaque et impression de cellules uniques basé sur lamicrofluidique optimisé pour l’efficacité, la viabilité et la génération de rapports de monoclonalité
A microfluidics-based, single cell printing and microplate imaging workflow optimized for efficiency, viability and monoclonality report generation
Dans cette note d’application, nous présentons un flux de travail unifié qui associe le dépôt de cellules uniques et la vérification de la clonalité. Nous couplons l’utilisation de SCP et de CSI pour déposer des cellules uniques dans…
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Note d'application
Services de profilage HTRF sur le lecteur de microplaques multimode SpectraMax iD5
HTRF profiling services on SpectraMax iD5 Multi-Mode Microplate Reader
L’équipe Custom Solutions Laboratory de Cisbio a travaillé en collaboration avec Molecular Devices pour générer des données pertinentes favorisant l’activité du service de profilage expert de Cisbio US…
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Note d'application
Mesurer les protéines totales dans des lysats cellulaires avec le lecteur de microplaques SpectraMax ABS Plus
Measure total protein in cell lysates with SpectraMax ABS Plus Microplate Reader
La quantification des concentrations de protéines issues des lysats cellulaires est une étape clé pour de nombreuses applications en aval, comme les tests Western Blot et les dosages d’immunoabsorption enzymatique (ELISA).
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Note d'application
Intégrez la quantification des protéines basée sur BCA au lecteur SpectraMax iD5
Streamline BCA-based protein quantitation on the SpectraMax iD5 reader
Apprenez à quantifier un échantillon de protéines cellulaires avec les kits de test de protéine BCA sur le lecteur de microplaques multimode SpectraMax® iD5.
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Note d'application
Validez les cellules éditées par CRISPR à l’aide de l’imagerie et de la détection par Western Blot sur un lecteur de microplaques
Validate CRISPR-Edited Cells using Imaging and Western Blot Detection on a Microplate Reader
L’édition du génome est largement utilisée pour étudier l’expression génique et la fonction des protéines, mais ces méthodes sont généralement laborieuses et inexactes. Le système CRISPR (Clustered Regularly Interspaced…
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Note d'application
Réaliser une solution de flux de travail cAMP en utilisant le Kit de test fluorescent CatchPoint cAMP
Complete cAMP workflow solution using the CatchPoint cAMP Fluorescent Assay Kit
Les GPCR, récepteurs couplés aux protéines G, sont des protéines transmembranaires importantes qui traduisent les signaux extracellulaires en réponses intracellulaires. Ces réponses intracellulaires se composent de…
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Note d'application
Utilisation du kit NanoOrange Protein avec les lecteurs de microplaques SpectraMax
Using the NanoOrange Protein Kit with SpectraMax Microplate Readers
Cette note d’application décrit l’utilisation du kit de quantification des protéines NanoOrange® Protein de Life Technologies sur les lecteurs de microplaques SpectraMax® avec le mode de détection par fluorescence et SoftMax…
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Note d'application
Écran AlphaLISA sur la plateforme de détection de microplaque multimode SpectraMax Paradigm
AlphaLISA Screen on the SpectraMax Paradigm Multi-Mode Microplate Detection Platform
L’inflammation est une réaction de l’organisme à une infection, à une irritation ou à toute autre lésion, qui s’accompagne d’une augmentation de la production de chimiokines endothéliales et de l’expression des molécules d’adhésion, ce qui peut entraîner…
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Note d'application
Quantification et analyse d’acides nucléiques grâce au spectrophotomètre QuickDrop
Nucleic acid quantitation and analysis using the QuickDrop Spectrophotometer
La spectrophotométrie est une technique bien établie utilisée pour quantifier et analyser des substances biologiques. Parmi ces substances, les acides nucléiques constituent l’un des…
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Note d'application
Comparaison des méthodes de clonage traditionnelles vs. l’imprimante CloneSelect Single-Cell Printer f.sight en utilisant les lignées cellulaires CHO couramment utilisées pour la production d’anticorps monoclonaux
Comparison of traditional cloning methods vs. CloneSelect Single-Cell Printer f.sight using CHO cell lines commonly used for monoclonal antibody production
Dans la mesure où les réglementations relatives au développement de lignées cellulaires sont de plus en plus strictes, vous devrez réaliser un clonage de cellules uniques et fournir des preuves indiquant qu’une lignée cellulaire dérive …
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Note d'application
Un flux de travail associant l’isolement de cellules uniques et l’imagerie sur microplaque améliore le rendement du clonage avec une assurance de clonalité supérieure
A workflow combining single-cell isolation and microplate imaging improves cloning efficiency with higher assurance of clonality
L’isolement de cellules uniques a de nombreuses applications allant de la génomique à cellule unique à la détection d’anticorps en passant par le développement de lignées cellulaires.
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Note d'application
Évaluez la viabilité et la prolifération cellulaires avec des lectures colorimétriques
Assess cell viability and proliferation with colorimetric readouts
Découvrez comment le lecteur de microplaques en absorbance permet d’obtenir une lecture colorimétrique de la viabilité et de la prolifération cellulaires.
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Note d'application
Normaliser les dosages des cytokines HTRF pour la viabilité cellulaire
Normalize HTRF cytokine assays to cell viability
Les cytokines pro- et anti-inflammatoires jouent un rôle central dans l’auto-immunité et les maladies inflammatoires et infectieuses. Elles jouent également un rôle clé dans les troubles du métabolisme et en oncologie…
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Note d'application
Comptage cellulaire avec le module d’analyse à lumière transmise dans MetaXpress
Counting cells with the Transmitted Light Analysis Module in MetaXpress
Des tests cellulaires sans marquage (label-free) sont nécessaires pour un grand nombre d’applications biologiques visant à suivre la numération cellulaire ainsi que la prolifération, la santé, la confluence et la cytotoxicité des cellules. Dans cette note d’application…
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Note d'application
Détermination de la santé des cellules par des tests de viabilité cellulaire utilisant le lecteur SpectraMax iD3
Measuring cell health on the SpectraMax iD3 reader with cell viability assays
La détermination de la santé des cellules à partir de divers paramètres de viabilité et les voies apoptotiques peuvent donner un aperçu des effets produits par divers traitements expérimentaux, notamment…
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Note d'application
Optimisez le flux de travail de la mesure des IgG dans le développement des lignées cellulaires
Streamline the workflow for measuring IgG in cell line development
Le processus de développement des lignées cellulaires pour la production de produits thérapeutiques à base d'anticorps peut varier énormément selon les équipes de recherche. L'objectif ultime est de trouver un clone produisant de manière stable de grandes…
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Note d'application
Mesures d'absorbance ADN et ARN avec les lecteurs de microplaques SpectraMax
DNA and RNA absorbance measurements using SpectraMax Microplate Readers
Les mesures d’ultraviolets (UV) dans les microplaques sont devenues possibles lorsque Molecular Devices a introduit le premier lecteur de microplaques pouvant détecter les UV. Depuis, les mesures dans les microplaques d’ADN, d’ARN et…
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Note d'application
Clonalité en toute confiance en utilisant la calcéine AM avec un effet minimal sur la viabilité
Confident assurance of clonality using calcein AM with minimal effect on viability
Le développement de lignées cellulaires qui expriment une protéine spécifique d’intérêt est essentiel à la génération de molécules biopharmaceutiques, telles que les anticorps monoclonaux. Pour établir une…cellule...
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Note d'application
Kit de test EarlyTox Live/Dead sur lecteurs de microplaques à fluorescence SpectraMax
EarlyTox Live/Dead Assay Kit on SpectraMax Fluorescence Microplate Readers
Les tests de viabilité cellulaire sont souvent effectués pour évaluer les effets d’un ensemble varié de traitements, notamment les médicaments candidats, les activateurs et les inhibiteurs des voies de signalisation, ainsi que les gènes rapporteurs. L’un des plus…
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Note d'application
Quantification d’échantillons d’ADN double brin à l’aide des kits de test d’ADNdb SpectraMax Quant
Quantitation of dsDNA samples using the SpectraMax Quant dsDNA Assay Kits
Comme différents types d’échantillons à tester peuvent contenir des concentrations différentes d’ADN, la sélection d’un réactif fluorescent approprié ayant la sensibilité et la plage de détection requises est…
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Note d'application
Création de courbes de confluence et de croissance sur le CloneSelect Imager
Confluence and growth curve generation on the CloneSelect Imager
La capacité de suivi de la prolifération cellulaire est de plus en plus importante, particulièrement avec l’utilisation accrue des lignées cellulaires in vitro en tant que systèmes modèle. Les taux de prolifération peuvent être utilisés pour…
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Note d'application
Amélioration du développement d'hybridomes spécifiques d’un virus en utilisant les technologies d'imagerie ClonePix et CloneSelect Imager
Enhanced development of virus-specific hybridomas using ClonePix and CloneSelect Imager Technologies
Le système ClonePix a été utilisé dans le criblage haut débit de centaines de colonies sous-clonées à partir d’un matériel d’hybridome parental (historiquement, les rendements de lignées parentales étaient inférieurs à 1 mg/…
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Note d'application
Optimisation de la transfection GFP avec la plate-forme de détection multimode SpectraMax i3.
Optimizing GFP transfection with the SpectraMax i3 Multi-Mode Detection Platform
L’expression des protéines fluorescentes, par exemple des protéines fluorescentes vertes (GFP), est souvent utilisée comme mesure pour les dosages par gène rapporteur. Dans un dosage typique de rapporteur, la séquence régulatrice…
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Note d'application
Quantification directe des protéines avec la microplaque à micro-volume SpectraDrop
Direct protein quantitation using the SpectraDrop Micro-Volume Microplate
La quantification des protéines en utilisant l’absorbance UV est une méthode non destructrice rapide s’appuyant sur l’absorbance des longueurs d’onde de lumière proches des UV par les résidus de tryptophane et de tyrosine dans…
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Note d'application
Tests de viabilité cellulaire en luminescense et de cytotoxicité sur le lecteur de microplaques multimode SpectraMax i3x
Luminescent cell viability and cytotoxicity assays on the SpectraMax i3x Multi-Mode Microplate Reader
Le test CellTiter-Glo de Promega utilise l’enzyme luciférase, qui nécessite de l’ATP pour générer de la lumière. Le signal luminescent produit durant le test dépend de la quantité d’ATP dans…
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Note d'application
Visualisation des vésicules infra-cellulaires pour la quantification de l’autophagie des cellules neuronales
Visualize subcellular vesicles to quantitate autophagy in neuronal cells
L’autophagie est un processus catabolique intracellulaire de séquestration et de dégradation des protéines et organites connus comme étant défaillants ou devenant simplement inutiles pour…
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Note d'application
Augmentation de la sensibilité des tests sans étape de lavage grâce à l’imagerie confocale
Increase sensitivity in no-wash assays using confocal imaging
Le criblage des surnageants d’hybridome pour les anticorps dirigés contre les antigènes de la surface cellulaire représente une étape importante dans la découverte et le développement d'anticorps pour des vaccins ou à des fins thérapeutiques…
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Note d'application
Détection et quantification des protéines avec le système de détection ScanLater Western blot
Detection and quantitation of protein with ScanLater Western Blot Detection System
La détection des protéines est actuellement importante en recherche pharmaceutique et clinique, et les Western Blots font partie des méthodes les plus fréquemment employées. Diverses techniques sont utilisées pour…
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Note d'application
Mesure de l’expression de la luciférase à l’aide du kit de test gène rapporteur SpectraMax Glo Steady-Luc.
Measuring luciferase expression using the SpectraMax Glo Steady-Luc Reporter Assay Kit
L’utilisation des gènes rapporteurs, tels que la luciférase, permet la surveillance non destructrice et hautement sensible de l’expression des gènes. La luciférase de luciole, une protéine monomère de 61 kD, est spécialement…
Vidéos et webinaires
Flux de travail sur les hybridomes