Découverte d’anticorps en utilisant l'expression des phages

Solutions automatisées pour augmenter l’efficacité des flux de travail de votre affichage de phage

Étapes de l'affichage de phage

Étape 1 : Adhérence sur plastique, "panning"

Le panning est un procédé itératif d’enrichissement des phages dans une population qui présente une liaison de haute affinité pour une cible d’intérêt par rapport à d’autres. Commencez par enrichir votre population de phages avec une liaison haute affinité en exposant la bibliothèque à votre antigène de choix, puis en éluant et en amplifiant uniquement ceux ayant l’affinité de liaison la plus élevée.
 

Étape 2 : Repiquage de colonies 

Le bactériophage sélectionné lors de l’étape précédente est alors cloné et sélectionné afin d’isoler chaque liant protéique unique.
 

Étape 3 : Interactions antigènes-anticorps 

Pendant le panning, les phages exprimant des protéines avec une liaison de haute affinité sont sélectionnés par rapport aux phages exprimant des protéines de moindre affinité. Ce processus de sélection qualitative requiert une validation au moyen de tests immunologiques plus quantitatifs afin d’évaluer les interactions anticorps-antigènes comme les tests ELISA, l’immunofluorescence, le HTRF, la fixation du complément, l’agglutination et/ou la précipitation.
 

Étape 4 : Criblage fonctionnel

Suite à la caractérisation des interactions anticorps-antigènes, les molécules candidates sont criblées pour déterminer leur activité fonctionnelle (p. ex., neutralisation virale ou efficacité du vaccin), souvent au moyen de tests cellulaires.