Imagerie 3D et analyse des modèles cellulaires comme les sphéroïdes, les organoïdes et la biologie « organe sur puce » pour le criblage des agents thérapeutiques contre le cancer
Découvrez nos systèmes d’imagerie haut contenu et notre solution logicielle d’analyse qui facilitent la recherche sur le cancer en utilisant des modèles cellulaires 3D biologiquent pertinents, tels que les sphéroïdes, les organoïdes et les systèmes « organe sur puce » qui simulent l’environnement in vivo d’une tumeur ou d’un organe.
Le cancer implique des changements qui permettent aux cellules de se développer et de se diviser de manière anarchique, d’envahir et de détruire les tissus adjacents, et enfin de produire des métastases dans des sites anatomiques éloignés. Les chercheurs qui étudient le cancer ont besoin d’outils leur permettant d’analyser plus facilement les interactions complexes et souvent mal comprises entre les cellules cancéreuses et leur environnement, et leur permettant d’identifier des cibles thérapeutiques.

Imagerie séquentielle de sphéroïdes du cancer de la prostate cultivés sur plaques « Cell-able » et traités à l’aide de 100 nM du médicament anti-cancéreux paclitaxel. Les cellules ont été colorées à l’aide de caspase-3/7 (vert, marqueur d’apoptose) et d’ethidium homodimer-1 (rouge, marqueur de nécrose), puis elles ont été imagées toutes les 30 minutes pendant 72 heures.
Flux de travail pour l’analyse des sphéroïdes cancéreux 3D dans un environnement de criblage haut débit
Les sphéroïdes peuvent être cultivés dans des plaques de 96 ou 384 puits, traités avec des composés et colorés avec des colorants qui révèlent les processus cellulaires et les voies impliqués. Dans certains cas, les sphéroïdes peuvent être représentés par imagerie sans lavage. Si nécessaire, ils peuvent également être fixés.
Simplifiez votre flux de travail en oncologie grâce à une vaste gamme de systèmes d’imagerie, de criblage cellulaire et de lecture de microplaques.
Le flux de travail illustre un processus simplifié d'analyse de sphéroïdes et des systèmes permettant d'optimiser vos recherches et d'augmenter votre débit.
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Mise en culture de sphéroïdes - Les cellules cancéreuses peuvent être mises en culture directement dans une plaque à fond arrondi et fixation ultra-faible ou un autre dispositif de laboratoire permettant de développer la morphologie habituelle d’un sphéroïde. Les autres appareils de laboratoire permettent de cultiver plusieurs sphéroïdes dans un seul puits.
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Traitement avec des composés – Après la formation de sphéroïdes, des composés à la concentration souhaitée sont ajoutés dans les puits, puis incubés pendant un ou plusieurs jours, en fonction du mécanisme étudié.
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Coloration pour les marqueurs – Une fois le traitement avec des composés terminé, des colorants sont directement ajoutés aux milieux. Il est possible d’utiliser des colorants ne nécessitant aucun lavage afin de ne pas perturber les sphéroïdes, mais, si nécessaire, ces derniers peuvent être minutieusement lavés même lorsque l’automatisation est utilisée.
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Acquisition d’images de sphéroïdes – Dans le corps du sphéroïde, les images peuvent être capturées de façon individuelle ou sous forme de Z Stack (plusieurs images prises à différentes profondeurs) en utilisant des équipements d’imagerie spécialisés.
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Analyse des cellules cancéreuses – Utilisez un logiciel d’analyse d’imagerie cellulaire pour réaliser une analyse quantitative des images des cellules afin de surveiller l’expression des différents marqueurs et de quantifier les résultats biologiques.
Imagerie confocale à haut débit des sphéroïdes pour le criblage des traitements anti-cancéreux
Au cours des dernières années, des progrès considérables ont été réalisés en matière de développement des agrégats de cellules tumorales in vitro à utiliser comme modèles pour les environnements tissulaires in vivo. Une fois ensemencés dans un puits d’une microplaque à fond arrondi et fixation ultra-faible, ces agrégats formeront un sphéroïde discret. Les sphéroïdes sont censés imiter le comportement tumoral plus efficacement que les mises en culture bidimensionnelles (2D) normales car, comme les tumeurs, ils contiennent à la fois des cellules profondément enfoncées et celles dont la surface est exposée, des cellules proliférantes et non proliférantes, ainsi qu’un centre hypoxique avec une couche externe bien oxygénée de cellules. Ces modèles sphéroïdes 3D sont utilisés avec succès dans les environnements de criblage pour l’identification d’agents thérapeutiques potentiels contre le cancer.
Même si le développement de tests de sphéroïdes robustes présente plusieurs difficultés, l’utilisation de l’imagerie automatisée à haut contenu et haut débit constitue une étape significative pour obtenir des tests plus pertinents de médicaments candidats pour la chimiothérapie
- Capturez un sphéroïde entier dans le champ de vision sous un grossissement de 20x
- Criblez des sphéroïdes 3D pertinents d’un point de vue biologique au format 96 ou 384 puits
- Utilisez l’imagerie confocale pour détecter avec précision les réponses cellulaires
- Conservez de l’espace de stockage en enregistrant seulement les reconstructions 2D des images dans le plan Z
Figure 1 - Criblez rapidement des sphéroïdes 3D dans des microplaques
(1a) Montage de vignettes d’images de sphéroïdes HCT116 dans une plaque de 96 puits traitée avec des composés et évaluée par imagerie avec un objectif Plan Fluor 10x. Les noyaux colorés avec le colorant Hoechst (en bleu) sont superposés avec de la CellEvent Caspase 3/7 marqueur d’apoptose (en vert).
(1b) Les témoins non traités sont dans la colonne 4 et (1c) une réponse Caspase 3/7 est évidente dans les colonnes 5–7 dans lesquelles du paclitaxel a été dilué en série au rapport 1:3 à partir de 1 µM dans la ligne A (réplicats de 3 partout).
(1d, 1e) Onze plans z ont été combinés en une image projetée maximale 2D et analysés avec un module personnalisé simple. Images brutes montrant des degrés faible et élevé d’apoptose avec leurs masques de segmentation correspondants (bleu roi = noyaux, rose = cellules apoptotiques).
(1f) En normalisant le degré d’apoptose par rapport aux sphéroïdes non traités et en réalisant un tracé sur un graphique, on peut voir que le paclitaxel (ligne verte) induit une apoptose à une concentration beaucoup plus faible que la mitomycine C ou l’étoposide.
Cellule apoptotique normalisée par rapport au témoin
Vidéo : Recherche sur l’angiogenèse pour les agents thérapeutiques contre le cancer
L’angiogenèse est un domaine important de la recherche et une cible pour les agents thérapeutiques contre le cancer. Dans cet interview, le Dr Bas Trietsch, Directeur de la technologie, MIMETAS, présente une nouvelle solution pour l’étude de l’angiogenèse : l'OrganoPlate® Graft qui est une plateforme de microplaques de mise en culture de cellules in vitro permettant la vascularisation de tissus en 3D.
Découvrez comment le système d’imagerie cellulaire automatisée ImageXpress® Pico et le système d’imagerie à haut contenu ImageXpress® Micro Confocal de Molecular Devices jouent un rôle essentiel dans le développement et l’analyse des modèles tissulaires 3D créés sur OrganoPlate Graft.

Avantages de la technologie d’imagerie 3D pour les sphéroïdes cancéreux
Les sphéroïdes cancéreux imitent le comportement tumoral bien plus efficacement que les cultures cellulaires 2D standard. Ces modèles sphéroïdes 3D sont utilisés avec succès dans les environnements de criblage pour l’identification d’agents thérapeutiques potentiels contre le cancer. Ces systèmes de mise en culture peuvent être utilisés dans une analyse à paramètres multiples afin de quantifier différents résultats biologiques, ce qui accélère le développement de médicaments contre le cancer.
Principaux avantages :
- Le développement de l’imagerie haut contenu 3D représente une étape importante pour obtenir des tests plus précis et plus pertinents
- Les systèmes de mise en culture 3D peuvent produire rapidement des sphéroïdes de cellules cancéreuses humaines uniformes pouvant être utilisés dans un format haut débit afin d’accélérer le développement des médicaments contre le cancer
- La recherche menée avec l’analyse d’images 3D confocales de cellules cancéreuses a permis la caractérisation à plusieurs paramètres de nombreux résultats biologiques
Applications et tests
Molecular Devices, l’un des leaders de l’industrie de l’imagerie cellulaire, propose une vaste gamme d’outils de recherche en sciences de la vie, de découverte de médicaments et de criblage haut débit. Nos systèmes d’imagerie haut contenu peuvent accélérer vos succès en matière de recherche bioanalytique sur le cancer. Nous fournissons également plusieurs configurations de nos lecteurs de microplaques multimode ainsi qu’une gamme de scanners microarray faciles à utiliser.
Découvrez comment notre technologie peut vous aider dans vos recherches sur les agents thérapeutiques contre le cancer.
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Sphéroïdes de cellules cancéreuses 3D
Les avancées rapides de la recherche sur le cancer au cours des dernières décennies ont bénéficié de l’augmentation de l’utilisation des sphéroïdes (agrégats 3D de cellules en culture), un outil de recherche précieux permettant une plus grande pertinence physiologique que la culture cellulaire 2D traditionnelle.
Découvrez comment les sphéroïdes formés en utilisant un certain nombre de types de cellules cancéreuses sont analysés avec les méthodes mentionnées dans nos notes d’application.
- Procédez à l’acquisition et à l’analyse d’images de sphéroïdes FUCCI
- Analyse 3D et caractérisation morphométrique des effets de composés sur des cultures de sphéroïdes cancéreux
- Imagerie confocale à haut débit des sphéroïdes pour le criblage des traitements anti-cancéreux
- Test d’imagerie multiparamétrique pour la mesure de la toxicité dans un modèle de tumeur
- Imagerie 3D de sphéroïdes de cellules cancéreuses
- Criblage haut-débit de cultures cellulaires 3D avec de multiple sphéroïdes haute densité sans charpente pour les études de toxicité dans le cancer.
Angiogenèse
L’angiogenèse est un facteur important dans la formation des vaisseaux sanguins et dans la progression du cancer in vitro avec des tests de formation de tubes est une méthode établie pour évaluer l’angiogenèse. De nouvelles méthodes récemment développées comme les modèles « organe sur puce », ou des méthodes in vivo utilisant le poisson-zèbre comme système modèle, fournissent des informations différentes pour étudier l’angiogenèse. Plus important encore, l’extrapolation de ces tests pour le criblage entraîne d’importantes difficultés pour l’acquisition et l’analyse des images.
Découvrez comment notre système d’imagerie haut contenu ImageXpress et notre logiciel MetaXpress permettent un flux de travail simplifié pour l’évaluation de l’angiogenèse en utilisant des modèles tels que le poisson-zèbre, les tests de formation de tubes et les tests « organe sur puce ».
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Autophagie, altération de l’ADN
La découverte et l’évaluation des traitements anticancéreux englobent le développement de modèles cellulaires, le criblage de nouveaux médicaments et la compréhension des mécanismes d’action pertinents. Les effets cellulaires des processus comme l’altération de l’ADN et l’autophagie, processus régulé de dégradation et de recyclage des protéines et des organites altérés en réponse à un stress cellulaire, peuvent être analysés de façon efficace en utilisant l’imagerie cellulaire automatisée.
Découvrez comment l’imagerie cellulaire automatisée offre une méthode efficace d'analyse des effets cellulaires des composés anticancéreux.
Migration de cellules
La migration cellulaire est définie au sens large par le mouvement des cellules d’un endroit vers un autre. Il s’agit d’un processus essentiel nécessaire à de nombreux événements biologiques, notamment au développement embryonnaire, à la cicatrisation des plaies et aux réponses immunologiques. L’invasion des tissus environnants par les cellules tumorales, ainsi que les métastases, sont des domaines de l’oncologie pouvant être étudiés au moyen de méthodes de migration cellulaire in vitro.
Découvrez comment mesurer la migration cellulaire dans le temps et réaliser une analyse en temps réel.
- Mesurez la migration cellulaire par imagerie accélérée discontinue des cellules vivantes
- Mesurez la migration cellulaire à l’aide d’un simple test d’égratignure avec imagerie de cellules vivantes par intervalle de temps
- Analyse de la migration cellulaire avec le test Oris Pro
- Évaluez la migration cellulaire avec les inserts FluoroBlok
- Tests de migration cellulaire
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Imagerie de cellules vivantes
L’imagerie de cellules vivantes est l’étude de la structure et du fonctionnement cellulaires dans des cellules vivantes par microscopie. Elle permet de visualiser et de quantifier des processus cellulaires dynamiques en temps réel.
L’imagerie de cellules vivantes englobe un grand nombre d’applications biologiques, allant des tests de cinétique à long terme au marquage fluorescent de cellules vivantes.
Découvrez comment les processus cellulaires sont analysés en utilisant les méthodes mentionnées dans nos notes d’application
Méthodes par luminescence
Les études sur le cancer utilisent souvent des méthodes par luminescence pour mesurer des paramètres tels que la viabilité cellulaire en réponse à un traitement médicamenteux, et les interactions biomoléculaires survenant en réponse à la stimulation des voies de signalisation cellulaire.
Ici, nous décrivons la façon dont le lecteur de microplaques multimode SpectraMax® iD5 donne des résultats optimaux pour les tests de luminescence. Découvrez comment vous pouvez :
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Technologie organoïde / Organe sur puce
La technologie à base d'organoïde, comme la technologie « organe sur puce » imite la physiologie organique par co-culture de cellules dans une matrice 3D de support et l’utilisation de canaux microfluidiques pour la perfusion de nutriments ou de composés dans les structures cellulaires obtenues. Elle est de plus en plus populaire comme modèle de criblage pertinent d’un point de vue biologique pour les nouveaux médicaments et la toxicité.
- Analyse d’images 3D et caractérisation de l’angiogenèse dans un modèle « organe sur puce »
- Vidéo : Modèles tissulaires physiologiquement pertinents utilisant une plateforme « organes sur puce » à haut débit
- Test haut contenu pour la caractérisation morphologique de réseaux neuronaux 3D dans une plateforme microfluidique
- Webinaire : Développement de modèles tissulaires « organe sur puce » haut débit pour la découverte de médicaments grâce à l’imagerie haut contenu
- Poster : Objectifs à immersion dans l’eau pour l’imagerie automatisée à haut contenu pour améliorer la précision et la qualité des tests biologiques complexes
Ressources pour faciliter vos recherches sur le cancer
Note d'application
Mesurez la viabilité des cellules cancéreuses avec un test de luminescence stable et homogène
Measure cancer cell viability using a homogeneous, stable luminescence assay
Les tests de viabilité cellulaire en luminescence offrent une certaine sensibilité et une certaine facilité du flux de travail pour surveiller les effets des diverses conditions expérimentales.
Note d'application
Mesurez l’interaction des protéines p53-MDM2 grâce à la technologie NanoBRET
Measure p53-MDM2 protein interaction with NanoBRET technology
Nous décrivons la validation du lecteur SpectraMax® iD5 avec la paire de contrôle NanoBRET™ PPI, constituée des protéines partenaires p53 et MDM2 en interaction.
Note d'application
Obtenez et analysez des images de sphéroïdes FUCCI sur le cytomètre SpectraMax MiniMax
Acquire and analyze images of FUCCI spheroids on the SpectraMax MiniMax cytometer
Les sphéroïdes sont des micro-environnements cellulaires tridimensionnels cultivés grâce à diverses méthodes spécialisées telles que les microplaques à faible adhésion. Cette culture cellulaire en 3D confère…
Note d'application
Criblage haut-débit de cultures cellulaires 3D avec de multiple sphéroïdes haute densité sans charpente pour les études de toxicité dans le cancer.
High-throughput screening of 3D cell cultures with multiple high density scaffold-free spheroids for cancer toxicity studies
Les modèles de sphéroïdes 3D deviennent populaires dans la recherche sur le cancer du fait qu'ils imitent mieux l'architecture tissulaire in vivo, l'expression génétique et le profil métabolique des tumeurs comparés aux…
Affiche scientifique
Analyse basée sur l’IA de phénotypes biologiques complexes
AI-based analysis of complex biological phenotypes
Les tests phénotypiques cellulaires sont devenus des alternatives de plus en plus attrayantes aux tests in vitro et in vivo traditionnels dans le développement de médicaments et l’évaluation de la sécurité…
Note d'application
Analyse d’images 3D et caractérisation de l’angiogenèse dans un modèle « organe sur puce »
3D image analysis and characterization of angiogenesis in organ-on-a-chip model
L’angiogenèse est le processus physiologique de formation et de remodelage de nouveaux vaisseaux sanguins et capillaires à partir de vaisseaux sanguins préexistants. Elle peut avoir lieu grâce à…
Note d'application
Test de formation de tubes à haut contenu utilisant un modèle d’angiogenèse 𝘪𝘯 𝘷𝘪𝘵𝘳𝘰
A high-content tube formation assay using an 𝘪𝘯 𝘷𝘪𝘵𝘳𝘰 angiogenesis model
L’angiogenèse, c’est-à-dire, la formation de nouveaux vaisseaux sanguins à partir de vaisseaux existants, constitue une étape critique impliquée dans divers processus biologiques, comme le bourgeonnement endothélial, la prolifération, la migration,…
Note d'application
Mesurez la migration cellulaire à l’aide d’un simple test d’égratignure avec imagerie de cellules vivantes par intervalle de temps
Measure cell migration using a simple scratch assay with timelapse live-cell imaging
Le mouvement ou la migration des cellules est étudié(e) depuis longtemps pour déterminer les mécanismes physiologiques de l’angiogenèse, de l’embryogenèse, de la métastase cancéreuse, des réponses immunitaires et de la cicatrisation des plaies.
Note d'application
Surveillez plusieurs étapes de l’apoptose à l’aide de l’imagerie cinétique de cellules vivantes
Monitor multiple stages of apoptosis with live cell kinetic imaging
L’étude de l’apoptose est essentielle à la découverte et au développement des médicaments. En outre, l’étude de la relation entre l’apoptose et d’autres facteurs, comme le stress oxydatif, est…
Note d'application
Surveiller la prolifération cellulaire et le cycle cellulaire en temps réel
Monitor cell proliferation and cell cycle in real time
Il est de plus en plus nécessaire d’élargir la variété et la complexité des tests cellulaires pour la recherche biologique et la découverte de médicaments. Les tests sur cellules vivantes permettent de surveiller les réponses cellulaires en temps…
Note d'application
Mesurer la migration cellulaire au moyen d’une imagerie séquentielle discontinue des cellules vivantes
Measure cell migration using discontinuous time-lapse imaging of live cells
La migration cellulaire est un processus essentiel nécessaire à de nombreux événements biologiques, notamment le développement embryonnaire, la cicatrisation des plaies, les métastases cancéreuses et les réponses immunologiques.
Note d'application
Détection de l’autophagie par imagerie automatisée
Detection of autophagy using automated imaging
Détectez et quantifiez les effets des composés sur le processus de l’autophagie avec le système ImageXpress Pico. La lignée cellulaire du neuroblastome humain PC12 a été utilisée comme modèle pour développer des tests.
Livre électronique
Puissance de l’imagerie cellulaire
Cellular Imaging Insights
Pour des résultats plus complets et plus rapides lors de vos études de structures cellulaires 2D et 3D grâce à l’imagerie cellulaire automatisée.
Note d'application
Caractérisation phénotypique des effets des médicaments anticancéreux avec l’imagerie automatisée
Phenotypic characterization of anti-cancer drug effects using automated imaging
La découverte et l’évaluation des traitements anticancéreux constituent un domaine de recherche dynamique qui englobe le développement de modèles cellulaires, le criblage de nouveaux médicaments, la comparaison de l’efficacité de médicaments et…
Livre électronique
Procédez à l’acquisition et à l’analyse d’images 3D de façon professionnelle
Acquire and analyze 3D images like a pro
Au cours des dernières années, d'importants progrès ont été réalisés dans le développement de modèles et techniques 3D. Ces méthodes comprennent les matrices biodégradables, les structures « organes sur puce » ou les…
Note d'application
Évaluation optimisée des lésions de l’ADN à l’aide du système ImageXpress Nano
Streamline assessment of DNA damage using the ImageXpress Nano system
L’évaluation des lésions de l’ADN ou des chromosomes fait couramment l’objet d’applications de recherche en raison des liens existant entre ces lésions et de nombreuses maladies, notamment les mutations génétiques, le cancer et le vieillissement. ADN…
Note d'application
Évaluation des inhibiteurs du cycle cellulaire à l’aide d'un test sur cellules vivantes
Evaluating cell cycle inhibitors using a live cell assay
Le suivi des effets d’un traitement sur le cycle cellulaire contribue au progrès de la recherche en oncologie et à la découverte de médicaments. Des tests de criblage haut contenu utilisant des cellules vivantes ont été développés pour permettre…
Note d'application
Évaluation de la migration cellulaire avec les inserts FluoroBlok sur le cytomètre SpectraMax MiniMax
Evaluate cell migration with FluoroBlok inserts on the SpectraMax MiniMax cytometer
La migration cellulaire, largement définie par le mouvement des cellules d’un endroit à un autre, est importante dans divers processus, notamment le développement embryonnaire et la cicatrisation des plaies. Il s’agit également…
Note d'application
Test d’imagerie multiparamétrique pour la mesure de la toxicité dans un modèle de tumeur
Multi-parameter imaging assay for measuring toxicity in a tumor model
Il existe un intérêt croissant pour l’utilisation des sphéroïdes tridimensionnels (3D) pour la modélisation du cancer et de la biologie tissulaire afin d'accélérer la recherche translationnelle. L’objectif de cette étude était de développer…
Note d'application
Analyse 3D et caractérisation morphométrique des effets de composés sur des cultures de sphéroïdes cancéreux
3D analysis and morphometric characterization of compound effects on cancer spheroid cultures
Les tests de transformation/tumorigénicité cellulaires avec des cultures de cellules en milieux semi-solides (agar mou ou Matrigel) ont été bien établis dans le cadre de la recherche sur le cancer1,2,5. Le test nécessite…
Note d'application
Imagerie confocale haut débit des sphéroïdes pour le criblage des agents thérapeutiques anticancéreux
High-Throughput Confocal Imaging of Spheroids for Screening Cancer Therapeutics
Au cours des dernières années, des progrès considérables ont été réalisés en matière de développement des agrégats de cellules tumorales in vitro à utiliser comme modèles pour les environnements tissulaires in vivo. Lors de l’ensemencement dans un puits…
Note d'application
Imagerie en 3D de sphéroïdes de cellules cancéreuses
3D Imaging of Cancer Cell Spheroids
De nombreuses lignées cellulaires cancéreuses forment des sphéroïdes si elles sont mises en culture sur une matrice tridimensionnelle (3D) favorable. On estime que ces sphéroïdes représentent davantage la physiologie tumorale que les cellules…
Note d'application
Analyse de migration cellulaires avec le test Oris Pro sur le cytomètre SpectraMax MiniMax
Cell migration analysis with Oris Pro assay on the SpectraMax MiniMax cytometer
La migration cellulaire, le mouvement des cellules d’un endroit vers un autre, est un composant essentiel des processus biologiques normaux et anormaux. L’importance de la migration cellulaire dans divers…
Note d'application
Tests d’imagerie haut débit utilisant le poisson-zèbre, un organisme modèle pour la recherche sur les maladies humaines
High-throughput imaging assays using zebrafish, a model organism for human disease
Depuis plusieurs années, le criblage du poisson-zèbre est considéré comme une solution de remplacement avantageuse de par son coût réduit, son débit moins exigeant et des préoccupations éthiques moindres. Le poisson-zèbre est un modèle utile pour la découverte…
Vidéos et webinaires

Recherche sur l’angiogenèse : Les systèmes d’imagerie à haut contenu permettent de débloquer le plein potentiel des modèles tissulaires 3D

Imagerie 3D des sphéroïdes cancéreux

Oliver Kepp et Jayne Hesley – Marqueurs du cancer – Détection et quantification des signatures de mort cellulaire avec l’imagerie haut contenu

ImageXpress Micro XLS

Imagerie 3D haut débit des sphéroïdes cancéreux

Hépatotoxicité utilisant des cellules hépatiques dérivées d’iPSC et modèle de pulsation dans des sphéroïdes cardiaques dérivés d’iPSC

Efficacité des médicaments anticancéreux dans des sphéroïdes HCT116

Outils pour augmenter la pertinence biologique des tests 3D