Développement de lignées cellulaires

Criblage d’expression à la surface cellulaire

De nombreuses protéines s’exprimant à la surface des cellules sont des cibles pour la découverte et le développement de produits biopharmaceutiques. Par exemple, les récepteurs couplés aux protéines G (GPCR) constituent la plus grande classe de protéines de surface cellulaire et sont des cibles pour pratiquement 40 % des médicaments existants. La découverte et la sélection de clones de grand intérêt grâce à l’expression élevée à la surface cellulaire des GPCR à partir d’un pool de cellules transfectées peuvent s’avérer complexes. Le système ClonePix 2 est une méthode automatisée pour le criblage de vastes populations de cellules, augmentant ainsi la probabilité de découvrir un liant de haute affinité rare ou un producteur élevé.

• Sélection rapide et automatisée de clones de cellules mammifères par expression de protéines de surface
• Sélection et développement rapides de lignées cellulaires de mammifères exprimant un RCPG à l’aide de la nouvelle technologie ClonePix
• Sélection rapide et efficace de cellules de mammifères à productivité élevée sécrétant des protéines non-mAb

Viabilité cellulaire

Pour développer des lignées cellulaires, il faut découvrir des clones cellulaires uniques produisant des taux élevés et constants de la protéine thérapeutique cible. Une première étape essentielle du processus consiste à isoler des cellules viables uniques. Les cellules uniques prolifèrent de manière à former des colonies, qui peuvent être évaluées pour la productivité de la protéine thérapeutique cible. La viabilité et les taux de croissance de clones cellulaires uniques peuvent être déterminés sur le CloneSelect Imager, le lecteur de microplaques SpectraMax i3x et le cytomètre d’imagerie.

• Création de courbes de confluence et de croissance sur le CloneSelect Imager
• Mesure de la viabilité cellulaire et de la cytotoxicité avec le kit EarlyTox™ d’Intégrité Cellulaire
• Tests de viabilité cellulaire en luminescence et de cytotoxicité
• Brochure : SpectraMax i3x

Titre et criblage pour la productivité de clones

Un élément important de l’identification des clones de valeur est la détermination de la productivité de colonies dérivées de cellules uniques. Le criblage pour la productivité au moyen d’approches traditionnelles est un processus laborieux et fastidieux, qui comporte plusieurs étapes, dont l’isolement de cellules uniques à partir d’une dilution limitante, suivie d’une évaluation du titre par ELISA. Le système ClonePix 2 combine la sélection des phénotypes, l’isolement de cellules uniques et le criblage de productivité en une seule étape, ce qui réduit considérablement le temps du criblage et augmente le nombre de candidats.

• Criblage et sélection rapides de clones stables à productivité élevée
• Optimisation automatisée de la production d’IgG dans des cellules CHO
• Développement amélioré d’hybridomes spécifiques d’un virus

Comparaison de méthodes de clonage classique par rapport à f.sight

Comme les réglementations relatives au développement de lignées cellulaires sont de plus en plus strictes, vous devrez réaliser un clonage de cellules uniques et fournir des preuves indiquant qu’une lignée cellulaire est dérivée d’une cellule unique (preuve de clonalité). Dans cette étude, nous avons conduit six ensembles d’expériences afin de présenter un flux de travail combiné f.sight + CSI avec une assurance élevée de monoclonalité dans un seul cycle de clonage. Nous avons également comparé l’efficacité du clonage de deux lignées cellulaires CHO en suspension sur un instrument CloneSelect f.sight single cell printer par rapport à deux autres méthodes de clonage classiques acceptées, la cytométrie en flux et la dilution limitante.

• Comparaison des méthodes de clonage traditionnelles vs. l’imprimante CloneSelect Single-Cell Printer f.sight en utilisant les lignées cellulaires CHO couramment utilisées pour la production d’anticorps monoclonaux

Recherche sur les maladies infectieuses et la COVID-19

Ici, nous abordons les applications couramment utilisées dans la recherche sur les maladies infectieuses, notamment le développement de lignées cellulaires, l’affinité de liaison, la neutralisation virale, le titre viral et bien plus encore, en mettant l’accent sur la compréhension du virus SARS-CoV-2 afin de développer des traitements potentiels pour la COVID-19, notamment des vaccins, des agents thérapeutiques et des diagnostics.

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Monoclonalité

Le développement de lignées cellulaires et l’assurance de la monoclonalité constituent des étapes essentielles du processus de génération de molécules biopharmaceutiques, telles que les anticorps monoclonaux. Une lignée cellulaire peut être établie après l’isolation d’une cellule viable unique exprimant fortement la protéine d’intérêt. La documentation de preuves de clonalité est l’une des étapes clés de ce processus. Cette preuve de clonalité est généralement documentée à partir d'images, où une image d’une cellule unique est générée et inclue dans les déclarations réglementaires.

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Tri de cellules uniques

Pour développer des lignées cellulaires, il faut découvrir des clones cellulaires uniques produisant des taux élevés et constants de la protéine thérapeutique cible. La première étape du processus est l’isolation des cellules uniques viables. La dilution limitante, une technique s’appuyant sur la probabilité statistique, requiert beaucoup de temps. L’imprimante CloneSelect Single-Cell Printer permet d’isoler facilement les cellules de façon à optimiser la viabilité cellulaire, tout en fournissant des preuves directes de clonalité par le biais de séries de cinq images capturées durant la distribution des cellules.

• Flux de travail d’imagerie sur microplaque et impression de cellules uniques basé sur lamicrofluidique optimisé pour l’efficacité, la viabilité et la génération de rapports de monoclonalité
• Un flux de travail associant l’isolement de cellules uniques et l’imagerie sur microplaque améliore le rendement du clonage avec une assurance de clonalité supérieure
• Fiche technique : Imprimante à cellule unique CloneSelect