Découverte et optimisation d’antigènes/immunogènes
Solutions pour la détection d’immunogènes et pour le développement d’un vaccin
Les flux de travail de développement d’un vaccin varient largement selon la plateforme choisie (p. ex., virus inactivé vs. vaccin à ADN), chacune ayant ses avantages spécifiques. La CEPI (Coalition pour les innovations en matière de préparation aux épidémies) et de nombreuses autres organisations encouragent ces diverses approches au cours d’une pandémie afin d’accroître la probabilité de réussite contre l’agent infectieux.
Dans cette vidéo, Justin Dranschack, directeur, plateforme BioPharma, passe en revue notre solution de flux du travail de développement d’un vaccin en utilisant des protéines recombinantes comme immunogène, et mentionne les systèmes pouvant vous aider dans vos recherches.
Flux du travail de détection d’antigènes/immunogènes
Étape 1 : Criblage de la liaison à un anticorps spécifique du virus
L'expression de phages est une puissante méthode in vitro qui peut être utilisée pour cribler des millions d’anticorps dirigés contre des antigènes viraux, qui sont alors considérés comme des candidats potentiels pour des vaccins.
Étape 2 : Caractérisation d’immunogène
Des études d’immunogénicité sont conduites afin de déterminer si les antigènes identifiés au cours de l’étape précédente induiront une réponse immunitaire, car l'affichage de phage ne crible que la liaison antigène-anticorps. Si l’antigène induit une réponse immunitaire (souvent mesurée par test ELISA), il est alors considéré comme immunogène et nous passons à l’étape suivante. L’immunogène est caractérisé de manière supplémentaire pour y construire des propriétés souhaitables durant l’étape suivante.
Étape 3 : Ingénierie de protéines (immunogènes)
Certaines propriétés des immunogènes sont connues pour générer des effets indésirables lorsqu’ils sont injectés chez l’animal ou chez l'être humain. Par conséquent, des outils d’ingénierie génétique, comme CRISPR/Cas9, sont utilisés pour manipuler l’ADN codant pour l’immunogène afin qu’il ne présente plus ces propriétés.
Étape 4 : Transfection et clonage cellulaires
Une fois l’ADN optimisé, il est nécessaire de faire passer la production de l’immunogène à une échelle supérieure pour effectuer des tests supplémentaires. À ce stade, il est essentiel de générer une lignée cellulaire à niveau d’expression élevé dérivée par clonage. Ce processus implique souvent les techniques d’ingénierie génétique décrites ci-dessus avec clonage de cellules uniques dans des plaques à micropuits, particulièrement en cas d'utilisation de lignées cellulaires de mammifère.
Étape 5 : Criblage des attributs de qualité, notamment le titre
Après le clonage de cellules uniques, la croissance des lignées cellulaires est surveillée et elles sont évaluées afin de déterminer l’expression des protéines. L’immunogène est alors purifié et préparé pour être injecté dans un animal afin d’induire une réponse immunitaire. Les anticorps générés par l’animal sont alors criblés au cours d’un test de neutralisation virale afin de déterminer l’efficacité du vaccin.
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