RCPG et canaux ioniques

RCPG et canaux ioniques

Nous proposons différents tests et instruments d’appui aux études des fonctions des GPCR et des canaux ioniques, notamment des kits de test, des systèmes d’imagerie et de criblage cellulaire, ainsi que des lecteurs de microplaques.

Les GPCR, récepteurs couplés aux protéines G, constituent la plus grande famille de protéines, comptant entre 600 et 1000 membres, et ont été associés à de nombreux états biologiques normaux ou pathologiques. Ils sont également connus sous le nom de récepteurs à sept domaines transmembranaires (7-TM) et constituent la cible d'environ 45 % des médicaments modernes. Les fonctions des GPCR sont très variées, ils reconnaissent en effet un grand nombre de ligands, notamment des photons, de petites molécules et des protéines.

Les canaux ioniques sont des pores dans la membrane cellulaire qui permettent aux ions de pénétrer dans la cellule et d’en sortir. Il existe plus de 400 gènes pour les canaux ioniques dans le génome humain. Nombre d’entre eux ont été ciblés par des médicaments qui sont à présent de grands succès. L’activité des canaux ioniques est directement mesurée avec des appareils d’électrophysiologie traditionnelle pour la méthode patch-clamp. Toutefois, le débit est très faible. L’activité des canaux ioniques peut également être mesurée indirectement, avec un débit beaucoup plus élevé, en utilisant des fluorophores sensibles aux variations du potentiel membranaire, du flux de calcium et du flux de potassium.

Techniques des GPCR et des canaux ioniques

  • Flux de calcium

    Flux de calcium

    L’évaluation du flux de calcium est une mesure largement acceptée, éprouvée et réelle de l’activité cellulaire. Le flux de calcium peut être utilisé comme mesure d’un ensemble de processus cellulaires tels que la libération de neurotransmetteurs, l’activité des GPCR, les canaux ioniques régulés par un ligand ou la tension et les profils de contraction des cardiomyocytes, entre autres. Convivial, sensible et configurable par l’utilisateur, le système FLIPR Tetra est un outil de découverte de médicaments servant à effectuer l’évaluation du flux de calcium à débit haut et ultra-haut.

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  • Suivi de l’activité des récepteurs couplés aux protéines Gq

    Suivi de l’activité des récepteurs couplés aux protéines Gq

    L’utilisation d'un lecteur de plaques de fluorescence et de colorants sensibles au calcium constitue la méthode la plus commune de suivi de l'activation des récepteurs couplés aux protéines Gq. La manipulation automatisée des liquides dans le lecteur de plaques est généralement requise pour distribuer des composés agonistes aux cellules dans la microplaque tandis que le système de détection réalise des lectures en temps réel des variations des valeurs d’intensité de la fluorescence induites par les composés. L’analyse des lectures cinétiques qui en résultent donne des informations sur les profils de réponse des composés, notamment les valeurs CE50 et CI50 pour les agonistes et antagonistes.

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  • Tests cinétiques des cellules vivantes

    Tests cinétiques des cellules vivantes

    Les systèmes d’imagerie haut contenu ImageXpress Confocal et Micro 4 offrent des modules de contrôle environnemental et fluidiques optionnels, permettant le pipetage à canal unique pour l’ajout de composés et le changement de milieu pendant les expériences cinétiques rapides ou séquentielles prolongées. Le kit de test cellulaire GPCR Transfluor est utilisé pendant le criblage haut contenu (HCS) afin de suivre l’activation des récepteurs couplés aux protéines G (GPCR). Pour ce faire, le kit de test quantifie la désensibilisation et le recyclage des GPCR en utilisant de la ß-arrestine marquée par GFP et une analyse automatisée des images.

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  • Criblage des cardiomyocytes

    Criblage des cardiomyocytes

    La prédiction précoce d’une cardiotoxicité fonctionnelle médicamenteuse requiert des systèmes in vitro robustes adaptés au criblage haut débit. Des cardiomyocytes humains dérivés d’iPSC, facilement disponibles, peuvent être utilisés avec des colorants sensibles au calcium, et les fréquences de battement sont suivies en tant que variations du calcium intracellulaire. Ces pics de calcium peuvent être analysés avec notre logiciel ScreenWorks PeakPro qui vous offre une série d’outils puissants pour la quantification de l’activité des cardiomyocytes.

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  • Tests de potassium

    Tests de potassium

    L’évaluation fonctionnelle des canaux potassiques dans une cellule est cruciale dans le processus de découverte de médicaments, tout particulièrement lorsque cela met en jeu la sécurité cardiaque. Le kit de test de potassium FLIPR® exploite la perméabilité des ions thallium (Tl+) à travers les canaux potassiques (K+) voltage et ligand-dépendants. Dans ce test, un nouveau colorant indicateur de Tl+ hautement sensible génère un signal fluorescent clair proportionnel au nombre de canaux potassiques ouverts, offrant une indication fonctionnelle de l'activité des canaux potassiques.

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  • Tests de potentiel membranaire

    Tests de potentiel membranaire

    Des canaux ioniques dépendant du voltage sont présents dans les membranes cellulaires excitables du cœur, des muscles squelettiques, du cerveau et des cellules nerveuses. Le fait de bloquer ou de moduler ces canaux peut avoir un effet thérapeutique ou peut interférer avec le fonctionnement normal des cellules. Ainsi, les composés qui affectent les canaux ioniques dépendant du voltage sont des cibles importantes dans la découverte des médicaments.

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Ressources sur les GPCR et les canaux ioniques

Produits et services connexes des GPCR et des canaux ioniques

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