Yashraj Biotechnology s’appuie sur le système ImageXpress Nano pour améliorer considérablement son imagerie et ses analyses multiparamétriques.
ENTREPRISE/UNIVERSITÉ
Yashraj Biotechnology Limited
MEMBRES DE L’ÉQUIPE
Dr Shweta Bhatt, Directeur scientifique et Responsable R&D
PRODUITS UTILISÉS
Système d’imagerie automatisé ImageXpress® Nano
Lecteur de microplaques multimode SpectraMax® iD5
Logiciel d’acquisition et d’analyse d’images haut contenu MetaXpress®
Le défi
La toxicité inattendue dans des domaines tels que la cardiotoxicité, l’hépatotoxicité et la neurotoxicité est une complication grave du traitement clinique et l’une des principales causes d’échec des médicaments candidats prometteurs en cours de développement. Les études animales sont largement utilisées pour la recherche en toxicologie afin de fournir une évaluation préclinique de la sécurité de divers agents thérapeutiques en cours de développement. Les différences entre les espèces en ce qui concerne la pénétration des médicaments dans la barrière hémato-encéphalique, le métabolisme des médicaments et la toxicité qui en découle contribuent à l’échec des essais pharmaceutiques lorsqu’ils passent du modèle animal à l’homme. Le système actuel de découverte de médicaments repose sur des lignées cellulaires immortalisées, des modèles animaux de maladies humaines et des essais cliniques sur l’homme. En outre, les médicaments candidats qui sont considérés comme sûrs au stade préclinique présentent souvent des effets toxiques au stade clinique. En moyenne, seuls environ 16 % des médicaments sont approuvés pour être utilisés chez l’homme.
Avant de passer à l’ImageXpress Nano, Yashraj Biotechnology utilisait un microscope à contraste de phase et à fluorescence, mais ne pouvait pas prendre des Z Stack de modèles sphéroïdes/organoïdes et ne disposait d’aucun logiciel d’analyse d’images.
- Dr Shweta Bhatt, Directeur scientifique, Yashraj Biotechnology
La solution
Yashraj Biotechnology mène actuellement des recherches de pointe dans le domaine des cellules souches et le système d’imagerie automatisé ImageXpress Nano leur a permis de mieux imager leurs hépatocytes, cardiomyocytes et cellules neurales dérivés d'iPSC développés en interne, ainsi que de développer plusieurs types différents de tests multiparamétriques.
Logiciel d’acquisition et d’analyse d’images à haut contenu d'informations MetaXpress
Système d'imagerie automatisé ImageXpress Nano
Lecteurs de microplaques multimode SpectraMax iD3 et iD5
Produits utilisés
Le système d’imagerie automatisé ImageXpress® Nano est doté d’un moteur durable, statique et léger ainsi que d'optiques fiables pour une sensibilité d’analyse adaptée. Capturez des détails fins dans un grand nombre de tests cellulaires et subcellulaires grâce à notre solution de microscopie à fluorescence puissante et flexible. Le système inclut le logiciel d’acquisition et d’analyse d’images haut contenu MetaXpress®, comprenant des outils d'imagerie 2D et 3D et de vidéomicroscopie, et répondant à de nombreux besoins, allant de la facilité d'utilisation à la mise en place de tests propriétaires.
Les lecteurs de microplaques multimode SpectraMax® iD3 et iD5 mesurent l’absorbance, la fluorescence et la luminescence. En outre, le lecteur iD5 mesure la TRF et la FP et peut être étendu pour inclure la TR-FRET, la HTRF®, le BRET, les tests à gène rapporteur Dual-Luciferase avec injecteurs, ainsi que la détection par immunotransfert. Avec des réactifs optimisés, le contrôle des lecteurs à partir de l’écran tactile ou d’un ordinateur et l’utilisation du logicielSoftMax® Proleader dans l’industrie, nos lecteurs offrent un accès complet à la recherche de pointe.
Les résultats
« Le système d’imagerie automatisé ImageXpress Nano permet une grande flexibilité pour l’imagerie d’un grand nombre d’échantillons, allant des agrégats cellulaires 3D aux cellules entières et aux organites sous-cellulaires. Contrairement aux microscopes à fluorescence classiques, l’[ImageXpress Nano] permet de se focaliser sur différents plans d’une structure 3D (sphéroïdes/organoïdes). Il permet également de contrôler l’environnement des échantillons à l’aide d’un contrôle prédéfini de l’humidité, du CO2 et de la température pour les expériences séquentielles et les caractéristiques d’imagerie de cellules vivantes. Le logiciel d’acquisition et d’analyse d’images haut contenu MetaXpress® permet de réaliser une imagerie et des analyses à l’aide de protocoles prédéfinis pour des types d’expériences spécifiques tout en ayant la possibilité de définir des protocoles personnalisés. Globalement, le système ImageXpress Nano est une excellente plateforme pour l’imagerie et les analyses multiparamétriques et à haut débit. » - Dr Shweta Bhatt, Responsable scientifique en chef, Yashraj Biotechnology
Figure : Test des excroissances des neurites : images représentatives de motoneurones du cerveau antérieur dérivés d’iPSC avec marquage à la ß-tubuline (vert) pour les cellules non traitées et traitées au Taxol. Motoneurones du cerveau antérieur traités avec des composés pendant trois jours, puis fixés et marqués avec de l’anti-ß-tubuline (TUJ-1).
Figure : Les cellules iPS pluripotentes expriment les marqueurs de la pluripotence. (A), Oct-4 (B) Nanog (C) SSEA4. Noyaux contre-colorés avec DAPI (bleu).
Figure : Perturbation du cytosquelette : images représentatives d’hépatocytes dérivés d’iPSC avec marquage de l’actine (vert) pour les cellules non traitées et traitées à la latrunculine. Hépatocytes traités avec des composés pendant trois jours, puis fixés et marqués avec de l’anti-phalloïdine-actine.
Figure : Test TUNEL : images représentatives de cardiomyocytes dérivés d’iPSC avec marquage TUNEL (vert) et iodure de propidium (rouge) pour les cellules non traitées et traitées à la doxorubicine. Cardiomyocytes traités avec des composés pendant trois jours, puis fixés et marqués avec TUNEL et IP.
Figure : Les cellules progénitrices neurales dérivées d’iPSC expriment les marqueurs des progéniteurs neuraux PAX6 et Nestin. Noyaux contre-colorés avec DAPI (bleu).
Figure : A. Les motoneurones du cerveau antérieur dérivés d’iPSC expriment les marqueurs neuronaux Tuj1. B. Les astrocytes dérivés d’iPSC expriment le marqueur neuronal GFAP et C. Les neurones dopaminergiques du mésencéphale dérivés d’iPSC expriment le marqueur neuronal thymidine hydroxylase (TH). Noyaux contre-colorés avec DAPI (bleu).