Solutions de développement de lignées cellulaires avec criblage de clones automatisé
Le système de repiquage de colonies de cellules de mammifères ClonePix® 2 est un système totalement automatisé de sélection de clones de valeur utilisés dans la détection d’anticorps et le développement de lignées cellulaires. Les hybridomes, cellules CHO et autres types de cellules sont évalués par imagerie et sélectionnés selon des paramètres que vous définissez. La manipulation des plaques, la lecture de codes-barres et la sélection sont totalement intégrées. Toutes les données, y compris les images, sont enregistrées pour une analyse en aval. Le système de sélection accroît la probabilité de trouver des lignées cellulaires produites de manière optimale et réduit significativement le temps de travail.
Caractéristiques
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Plusieurs méthodes de détection
La lumière blanche permet d’identifier et de mesurer la morphologie des clones, leur taille et leur proximité. La fluorescence indique le niveau d’expression et/ou la spécificité. Il existe jusqu'à cinq filtres fluorescents disponibles pour le multiplexage.
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Maintien de la stérilité
De nombreuses caractéristiques et options de stérilisation, y compris un processus à lumière UV pour la stérilisation de l’intérieur de l’instrument ainsi qu’un système de lavage et de séchage halogène des pointes, sont standards.
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Rangement intégré pour les plaques
Inclut deux rayons de rangement pour les plaques source et destination, chacun ayant une capacité de 10 plaques.
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Formation discrète de colonies
Le milieu semi-solide CloneMediaTM favorise le développement de cellules uniques en colonies discrètes et facilite l'étalement. Ce milieu permet de cribler une plus grande densité de clones.
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Réactifs et milieux sans produit animal
Le milieu de culture cellulaire CloneMedia sans produit animal et défini chimiquement est optimal pour accroître votre productivité et faciliter la visualisation des anticorps sécrétés lorsqu’il est utilisé avec l’agent de détection CloneDetectTM.
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Options d’automatisation personnalisées*
L’équipe Advanced Workflow Engineering Solutions peut personnaliser le système de monoclonalité et proposer des services supplémentaires tels que la vérification de monoclonalité intégrée.
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Brochure
Accélérez le développement de lignées cellulaires
Accelerate Cell Line Development
Découvrez dans ce document PDF comment accélérer votre développement de lignées cellulaires et détecter plus rapidement les « hits » de valeur que vous recherchez.
Applications du système de sélection de colonies de cellules de mammifères ClonePix 2
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Développement de lignées cellulaires
Le développement de lignées cellulaires est une étape essentielle du processus de création de molécules biopharmaceutiques, telles que les anticorps monoclonaux. Le processus commence souvent par la transfection du type de cellule hôte avec l’ADN codant pour la protéine thérapeutique d’intérêt, ce qui permet une intégration aléatoire ou dirigée de l’ADN cible dans le génome de la cellule hôte. Des milliers de clones sont criblés pour isoler les cellules rares qui présentent une productivité élevée, ce qui est un processus manuel fastidieux.
Développement de lignées cellulaires
Le développement de lignées cellulaires est une étape essentielle du processus de création de molécules biopharmaceutiques, telles que les anticorps monoclonaux. Le processus commence souvent par la transfection du type de cellule hôte avec l’ADN codant pour la protéine thérapeutique d’intérêt, ce qui permet une intégration aléatoire ou dirigée de l’ADN cible dans le génome de la cellule hôte. Des milliers de clones sont criblés pour isoler les cellules rares qui présentent une productivité élevée, ce qui est un processus manuel fastidieux.
Criblage d’expression à la surface cellulaire
De nombreuses protéines s’exprimant à la surface des cellules sont des cibles pour la découverte et le développement de produits biopharmaceutiques. Par exemple, les récepteurs couplés aux protéines G (GPCR) constituent la plus grande classe de protéines de surface cellulaire et sont des cibles pour pratiquement 40 % des médicaments existants. La découverte et la sélection de clones de grand intérêt grâce à l’expression élevée à la surface cellulaire des GPCR à partir d’un pool de cellules transfectées peuvent s’avérer complexes. Le système ClonePix 2 est une méthode automatisée pour le criblage de vastes populations de cellules, augmentant ainsi la probabilité de découvrir un liant de haute affinité rare ou un producteur élevé.
- Sélection rapide et automatisée de clones de cellules mammifères par expression de protéines de surface
- Sélection et développement rapides de lignées cellulaires de mammifères exprimant un RCPG à l’aide de la nouvelle technologie ClonePix
- Sélection rapide et efficace de cellules de mammifères à productivité élevée sécrétant des protéines non-mAb
Criblage d’expression à la surface cellulaire
De nombreuses protéines s’exprimant à la surface des cellules sont des cibles pour la découverte et le développement de produits biopharmaceutiques. Par exemple, les récepteurs couplés aux protéines G (GPCR) constituent la plus grande classe de protéines de surface cellulaire et sont des cibles pour pratiquement 40 % des médicaments existants. La découverte et la sélection de clones de grand intérêt grâce à l’expression élevée à la surface cellulaire des GPCR à partir d’un pool de cellules transfectées peuvent s’avérer complexes. Le système ClonePix 2 est une méthode automatisée pour le criblage de vastes populations de cellules, augmentant ainsi la probabilité de découvrir un liant de haute affinité rare ou un producteur élevé.
- Sélection rapide et automatisée de clones de cellules mammifères par expression de protéines de surface
- Sélection et développement rapides de lignées cellulaires de mammifères exprimant un RCPG à l’aide de la nouvelle technologie ClonePix
- Sélection rapide et efficace de cellules de mammifères à productivité élevée sécrétant des protéines non-mAb
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Titre et criblage pour la productivité de clones
Un élément important de l’identification des clones de valeur est la détermination de la productivité de colonies dérivées de cellules uniques. Le criblage pour la productivité au moyen d’approches traditionnelles est un processus laborieux et fastidieux, qui comporte plusieurs étapes, dont l’isolement de cellules uniques à partir d’une dilution limitante, suivie d’une évaluation du titre par ELISA. Le système ClonePix 2 combine la sélection des phénotypes, l’isolement de cellules uniques et le criblage de productivité en une seule étape, ce qui réduit considérablement le temps du criblage et augmente le nombre de candidats.
Titre et criblage pour la productivité de clones
Un élément important de l’identification des clones de valeur est la détermination de la productivité de colonies dérivées de cellules uniques. Le criblage pour la productivité au moyen d’approches traditionnelles est un processus laborieux et fastidieux, qui comporte plusieurs étapes, dont l’isolement de cellules uniques à partir d’une dilution limitante, suivie d’une évaluation du titre par ELISA. Le système ClonePix 2 combine la sélection des phénotypes, l’isolement de cellules uniques et le criblage de productivité en une seule étape, ce qui réduit considérablement le temps du criblage et augmente le nombre de candidats.
Criblage d’hybridomes
La technique de détection d'anticorps renvoie généralement au criblage et à l’identification d’anticorps monoclonaux (mAb) qui ciblent un épitope spécifique pour le diagnostic et le traitement de maladies. Une approche commune pour la génération des anticorps monoclonaux comprend la fusion d’une cellule cancéreuse pré-mitotique avec un lymphocyte B terminal post-mitotique exprimant les anticorps provenant de la rate. La cellule fusionnée qui en résulte est un hybridome et a l’avantage de produire des mAb tout en se divisant pour se régénérer. Le criblage des hybridomes pour la spécificité de liaison ou la productivité peut être automatisé avec le système ClonePix 2.
Criblage d’hybridomes
La technique de détection d'anticorps renvoie généralement au criblage et à l’identification d’anticorps monoclonaux (mAb) qui ciblent un épitope spécifique pour le diagnostic et le traitement de maladies. Une approche commune pour la génération des anticorps monoclonaux comprend la fusion d’une cellule cancéreuse pré-mitotique avec un lymphocyte B terminal post-mitotique exprimant les anticorps provenant de la rate. La cellule fusionnée qui en résulte est un hybridome et a l’avantage de produire des mAb tout en se divisant pour se régénérer. Le criblage des hybridomes pour la spécificité de liaison ou la productivité peut être automatisé avec le système ClonePix 2.
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Détection d’anticorps monoclonaux
La détection d’anticorps renvoie généralement au criblage et à l’identification d’anticorps spécifiques qui ciblent une molécule d’antigène pour le diagnostic et le traitement de maladies. La spécificité de l’anticorps se base sur sa capacité à se lier à l’épitope, une région unique sur la molécule d’antigène. Les anticorps thérapeutiques sont généralement monoclonaux, dérivés de cellules uniques et ciblent une région d’épitope unique sur l’antigène. Le système ClonePix 2 automatise le criblage et la détection rapide des clones spécifiques de l’antigène à partir d’une population hétérogène de cellules.
Détection d’anticorps monoclonaux
La détection d’anticorps renvoie généralement au criblage et à l’identification d’anticorps spécifiques qui ciblent une molécule d’antigène pour le diagnostic et le traitement de maladies. La spécificité de l’anticorps se base sur sa capacité à se lier à l’épitope, une région unique sur la molécule d’antigène. Les anticorps thérapeutiques sont généralement monoclonaux, dérivés de cellules uniques et ciblent une région d’épitope unique sur l’antigène. Le système ClonePix 2 automatise le criblage et la détection rapide des clones spécifiques de l’antigène à partir d’une population hétérogène de cellules.
Monoclonalité
Le développement de lignées cellulaires et l’assurance de la monoclonalité constituent des étapes essentielles du processus de génération de molécules biopharmaceutiques, telles que les anticorps monoclonaux. Une lignée cellulaire peut être établie après l’isolation d’une cellule viable unique exprimant fortement la protéine d’intérêt. La documentation de preuves de clonalité est l’une des étapes clés de ce processus. Cette preuve de clonalité est généralement documentée à partir d'images, où une image d’une cellule unique est générée et inclue dans les déclarations réglementaires.
Monoclonalité
Le développement de lignées cellulaires et l’assurance de la monoclonalité constituent des étapes essentielles du processus de génération de molécules biopharmaceutiques, telles que les anticorps monoclonaux. Une lignée cellulaire peut être établie après l’isolation d’une cellule viable unique exprimant fortement la protéine d’intérêt. La documentation de preuves de clonalité est l’une des étapes clés de ce processus. Cette preuve de clonalité est généralement documentée à partir d'images, où une image d’une cellule unique est générée et inclue dans les déclarations réglementaires.
Caractéristiques et options du système de sélection de colonies de cellules de mammifères ClonePix 2
Ressources du système de sélection de colonies de cellules de mammifères ClonePix 2
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Brochure
Accélérez le développement de lignées cellulaires
Accelerate Cell Line Development
Découvrez dans ce document PDF comment accélérer votre développement de lignées cellulaires et détecter plus rapidement les « hits » de valeur que vous recherchez.
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Brochure
Système de sélection de colonies de cellules de mammifères ClonePix 2
ClonePix 2 Mammalian Colony Picker
Redéfinissez le criblage et la sélection des clones grâce à des protocoles de développement transformationnel de lignées cellulaires.
Dépliant
Criblage haut débit des cellules souches
High-throughput stem cell screening
La médecine régénérative peut permettre de guérir certaines des maladies les plus dévastatrices du monde. Toutefois, il demeure de nombreux obstacles lorsqu’il s’agit de faire bouger ces traitements…
Livre électronique
Accélérez le développement d’un vaccin
Accelerate vaccine development
L’immunologie constitue plus que jamais l’un des principaux domaines de la recherche. Les anticorps monoclonaux (mAb) continuent à être suivis avec grand intérêt comme agents thérapeutiques potentiels…
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Livre électronique
Optimisez vos lignées cellulaires de grand intérêt
Optimize your high-value cell lines
Ces dix dernières années, la production d’anticorps monoclonaux (mAb) et de protéines recombinantes en utilisant des cellules de mammifères a conduit à une forte augmentation de l’introduction de protéines biothérapeutiques…
Affiche scientifique
Réduction des délais pour isoler des clones stables de cellules CHO DG44 produisant des titres élevés d'anticorps monoclonaux
Reducing the Timeline for Isolating Stable CHO DG44 Clones Producing High Titers of Monoclonal Antibody
Le système CloneSelect Imager produit plus rapidement des résultats objectifs, quantitatifs et cohérents , et permet de contourner les difficultés associées aux techniques traditionnelles d’évaluation de la confluence des cellules.
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Affiche scientifique
Criblage et sélection de clones PER.C6® en une seule étape rapide grâce à la technologie ClonePix
Accelerated one-step screening and selection of PER.C6® clones using ClonePix technology
Sur cette affiche, nous présentons les données démontrant que CloneMedia-PER.C6 favorise la croissance des cellules en colonies discrètes pouvant être traitées par imagerie, classées et sélectionnées avec la plateforme ClonePix…
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Affiche scientifique
Criblage à haut débit et sélection rapide de populations de clones de cellules productrices de protéines/anticorps thérapeutiques et de lignées cellulaires rapporteuses, à l’aide des techniques de test cellulaire par fluorescence
Rapid High-Throughput Screening and Selection for Clonal Populations of Therapeutic Protein/Antibody Producer Cells and Reporter Cell-Lines, Using Fluorescence Cell Based Assay Techniques
Ce fichier PDF explique la technologie ClonePix FL basée sur la culture de lignées de cellules de mammifères dans des milieux semi-solides provenant d’une seule cellule parente.
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Affiche scientifique
Criblage automatisé de clones HEK293F à production élevée et analyse des modifications post-translationnelles de protéines sécrétées
Automated Screening of High Producer HEK293F Clones and Analysis of Post-Translational Modifications of Secreted Proteins
La production d’agents thérapeutiques à tolérance accrue est la principale compétence d’Octagene. Les patients hémophiles sont traités leur vie durant par des médicaments visant à prévenir les hémorragies. Le risque quotidien de…
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Affiche scientifique
Évaluation de la monoclonalité sous criblage de lignées de cellules de mammifères par ClonePix FL
Assessing Monoclonality Under Screening of Mammalian Cell Lines by ClonePix FL
L’isolement de clones de cellules de mammifères candidats par dilution limitée, par clonage en anneau (cloning-ring) ou par la simple collecte manuelle de colonies, est une procédure chronophage, nécessitant d'importantes ressources et coûteuse…
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Affiche scientifique
Criblage haut débit et sélection de clones super-sécréteurs stables
High Throughput Screening and Selection of Stable High Secreting Clones
L’isolement de clones de cellules de mammifères par dilution limitée, par anneau de clonage (cloning-ring) ou par la simple collecte manuelle de colonies, est une procédure chronophage, nécessitant d’importantes ressources et coûteuse qui…
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Affiche scientifique
Criblage haut débit et sélection de populations de clones de lignées de cellules rapporteuses à l’aide des techniques de tests cellulaires par fluorescence
High Throughput Screening and Selection of Clonal Populations of Reporter Cell Lines, using Fluorescence Cell Based Assay Techniques
Les progrès en matière de techniques de culture cellulaire facilitent le développement de nouveaux tests de criblage et permettent l’utilisation des tests cellulaires pour le criblage haut débit dans le cadre des programmes de développement de médicaments…
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Affiche scientifique
Criblage et sélection rapides de clones stables à productivité élevée
Rapid Screening and Selection of Stable High Producing Clones
Le criblage de populations cellulaires pour des clones stables à productivité élevée est une étape limitante mais essentielle dans le développement et la production de nouvelles protéines thérapeutiques.
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Affiche scientifique
Éliminer la nécessité d’un traitement haut débit dans le développement des lignées cellulaires : Criblage cellulaire rapide et sélectif in situ par reconnaissance des phosphopeptides
Bypassing the Need for High Throughput Processing in Cell Line Development: Rapid, Selective in Situ Cell Screening by Phosphopeptide Recognition
La technologie de culture cellulaire animale a été propulsée au premier plan de l’industrie biopharmaceutique en raison de la meilleure fidélité des cellules de mammifères dans la production de…cliniquement pertinents
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Brochure
Réactifs et consommables
Reagents and Supplies
Molecular Devices propose des produits et des solutions inégalés utilisant l’imagerie et l’analyse d’images intelligente pour faciliter la recherche fondamentale, le développement pharmaceutique et biothérapeutique…
Infographie
Évolution du rôle des cellules CHO dans le développement de lignées cellulaires
The Evolution of CHO Cells' Role in Cell Line Development
Suivez l’évolution des cellules CHO issues de CHO-ori à CHO-K1SV. Apprenez-en davantage sur les propriétés des cellules CHO, idéales pour le développement de lignées cellulaires.
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Affiche scientifique
Criblage rapide, sélectif et in situ d’hybridomes en milieu semi-solide
Rapid Selective in Situ Screening of Hybridomas in Semi-Solid Medium
Découvrez un test de sécrétion sélectif d’hybridomes simple, à étape unique, pour détecter et isoler des clones d’hybridomes sécrétant des IgG spécifiques à l’antigène en 8 jours à peine après la fusion avec…
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Affiche scientifique
Intégration de la sélection de colonies automatisées dans le processus de développement de lignées cellulaires à suivi rapide
Integration of Automated Colony Picking into Fast Track Cell Line Development Process
Téléchargez le PDF pour découvrir le processus de développement de lignées cellulaires à suivi rapide avec un système de sélection de colonies intégré et automatisé.
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Affiche scientifique
Sélection et développement rapides de lignées de cellules de mammifères exprimant un GPCR en utilisant la nouvelle technologie ClonePix
Rapid Selection and Development of GPCR Expressing Mammalian Cell Lines using Novel ClonePix Technology
Découvrez comment cribler les cellules GPCR à haute expression avec le système ClonePix 2.
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Affiche scientifique
Développement rapide d'un processus de production sans sérum de cellules CHO adaptées à la suspension
Rapid Development of a Serum-Free, Suspension-Adapted CHO Cell Production Process
Téléchargez le PDF pour découvrir le processus de développement des lignées cellulaires CHO sans sérum.
Note d'application
Sélection rapide et efficace de cellules de mammifères à productivité élevée sécrétant des protéines non-mAb
Rapid and efficient selection of high producing mammalian cells secreting non-mAb proteins
La technologie utilisée par les systèmes ClonePix élimine le recours à la dilution en série ou à des techniques de tri de cellules. Cela permet d’établir des populations monoclonales de cellules super-sécrétrices dans un…
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Note d'application
Utilisation du système ClonePix pour évaluer la monoclonalité
Using ClonePix System to assess monoclonality
Le système ClonePix a été développé pour contourner plusieurs inconvénients généralement associés à l’isolation de clones de cellules de mammifères de choix, pendant le criblage et la sélection de…
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Note d'application
Sélection rapide et automatisée de clones de cellules mammifères par expression de protéines de surface
Rapid automated selection of mammalian cell colonies by cell surface protein expression
La capacité de sélection des cellules fondée sur l’expression des protéines de surface présente un grand intérêt pour l’établissement de lignées cellulaires exprimant le ou les récepteurs d’intérêt pour le phénotypage/génotypage en aval…
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Note d'application
Sélection et développement rapides de lignées cellulaires de mammifères exprimant un RCPG à l’aide de la nouvelle technologie ClonePix
Rapid selection and development of GPCR expressing mammalian cell lines using novel ClonePix Technology
La détection et la sélection de clones de GPCR à niveau d’expression élevé à partir d’un pool de cellules transfectées peut s’avérer une étape complexe lors du développement de lignées cellulaires. La technologie des systèmes ClonePix 2…
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Note d'application
Amélioration du développement d'hybridomes spécifiques d’un virus en utilisant les technologies d'imagerie ClonePix et CloneSelect Imager
Enhanced development of virus-specific hybridomas using ClonePix and CloneSelect Imager Technologies
Le système ClonePix a été utilisé dans le criblage haut débit de centaines de colonies sous-clonées à partir d’un matériel d’hybridome parental (historiquement, les rendements de lignées parentales étaient…
Publications
Le criblage séquentiel avec ClonePix FL et le marquage intracellulaire facilite l’isolement des lignées cellulaires à production élevée pour la fabrication des anticorps monoclonaux
Sequential screening by ClonePix FL and intracellular staining facilitate isolation of high producer cell lines for monoclonal antibody manufacturing
La génération de lignées cellulaires stables exprimant des anticorps monoclonaux (mAb) thérapeutiques à des fins de fabrication est un processus fastidieux et long.
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Publications
Position de l’industrie par rapport à l’importance relative de la clonalité des lignées cellulaires produisant des agents biopharmaceutiques
Industry view on the relative importance of clonality of biopharmaceutical-producing cell lines
Récemment, plusieurs autorités sanitaires ont demandé des informations détaillées aux entreprises commanditaires en ce qui concerne les pratiques employées pour générer la lignée cellulaire de production pour…
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Publications
ClonePix FL et le marquage intracellulaire facilitent l’isolement des lignées cellulaires à production élevée pour la fabrication des anticorps monoclonaux
ClonePix FL and intracellular staining facilitate isolation of high producer cell lines for monoclonal antibody manufacturing
Dans cet article, nous décrivons une méthode de criblage double permettant d’identifier en toute confiance des producteurs importants au début du processus DLC. Tout d’abord, ClonePix FL a été utilisé pour isoler des…
Flux de travail de développement de lignées cellulaires stables
Flux de travail sur les hybridomes
Flux de travail sur la sélection de cellules de mammifères à productivité élevée sécrétant des protéines non mAb - Présentation rapide de SynBioBeta
Flux de travail optimal pour identifier rapidement les anticorps neutralisants dirigés contre les particules virales
Identification et sélection de lignées cellulaires GPCR avec ClonePix 2
ClonePix 2
Number of Citations*: 353
Latest Citations: For a complete list, please click here .
*Source: https://scholar.google.com/
Dated: Dec 01, 2017Publication Name: Journal of Immunological MethodsSequential screening by ClonePix FL and intracellular staining facilitate isolation of high producer cell lines for monoclonal antibody manufacturing
Screening and characterization of cell lines for stable production are critical tasks in identifying suitable recombinant cell lines for the manufacture of protein therapeutics. To aid this essential function we have developed a methodology for the selection of antibody expressing cells using fluorescence based ClonePix FL colony isolation and… View moreScreening and characterization of cell lines for stable production are critical tasks in identifying suitable recombinant cell lines for the manufacture of protein therapeutics. To aid this essential function we have developed a methodology for the selection of antibody expressing cells using fluorescence based ClonePix FL colony isolation and flow cytometry analysis following intracellular staining for immunoglobulin G (IgG). Our data show that characterization of cells by flow cytometry early in the clone selection process enables the identification of cell lines with the potential for high productivity and helps to eliminate unstable cell lines. We further demonstrate a correlation between specific productivity (qP) and intracellular heavy chain (HC) content with final productivity. The unique combination of screening using ClonePix FL and the flow cytometry approaches facilitated more efficient isolation of clonal cell lines with high productivity within a 15 week timeline and which can be applied across NS0 and CHO host platforms. Furthermore, in this study we describe the critical parameters for the ClonePix FL colony based selection and the associated calculations to provide an assessment of the probability of monoclonality of the resulting cell lines.
Contributors: Gargi Roya, Guillermo Miro-Quesadab, Li Zhuanga, Tom Martina, Jie Zhub, Herren Wua, Marcello Marellia, Michael A.Bowena
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Dated: Dec 14, 2015Publication Name: 24th European Society for Animal Cell Technology (ESACT) Meeting: C2P2: Cells, Culture, Patients, Products
CHO-DHFR cell line development platform: Application of Clonepix and Automated Mini Bioreactor (AMBR) technologies to meet accelerated timelines
The Holy Grail sought by all Bioprocess Cell Line Development (CLD) groups is achieving high yields from easily-cultured, robustly-growing cells in timelines measured in weeks rather than months. As the first bottleneck in process development, CLD must first birth its product for upstream and downstream groups to initiate their own reproductive… View moreThe Holy Grail sought by all Bioprocess Cell Line Development (CLD) groups is achieving high yields from easily-cultured, robustly-growing cells in timelines measured in weeks rather than months. As the first bottleneck in process development, CLD must first birth its product for upstream and downstream groups to initiate their own reproductive cycles. To facilitate shortened CLD timelines, scientists have turned to new technologies and automation platforms. Emerging high-throughput instrumentation such as Clonepix and Automated MicroBioreactors (AMBR) have been enthusiastically integrated into stable cell line generation platforms; however, application of these methodologies among users is divergent.
Contributors: Venkata R Mangalampalli, Dyane Wycuff, Mingzhong Chen, David Berlinger, Elizabeth H Scheideman, Amritha Menon, Guilia Fabozzi, Althaf Hussain & Richard M Schwartz
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Dated: May 25, 2014Publication Name: New Biotechnology
High-throughput ClonePix FL analysis of mAb-expressing clones using the UCOE expression system
Therapeutic recombinant monoclonal antibodies (mAbs) are commonly produced by high-expressing, clonal, mammalian cells. Creation of these clones for manufacturing remains heavily reliant on stringent selection and gene amplification, which in turn can lead to genetic instability, variable expression, product heterogeneity and prolonged development… View moreTherapeutic recombinant monoclonal antibodies (mAbs) are commonly produced by high-expressing, clonal, mammalian cells. Creation of these clones for manufacturing remains heavily reliant on stringent selection and gene amplification, which in turn can lead to genetic instability, variable expression, product heterogeneity and prolonged development timelines. Inclusion of cis-acting ubiquitous chromatin opening elements (UCOE™) in mammalian expression vectors has been shown to improve productivity and facilitate high-level gene expression irrespective of the chromosomal integration site without lengthy gene amplification protocols. In this study we have used high-throughput robotic clone selection in combination with UCOE™ containing expression vectors to develop a rapid, streamlined approach for early-stage cell line development and isolation of high-expressing clones for mAb production using Chinese hamster ovary (CHO) cells. Our results demonstrate that it is possible to go from transfection to stable clones in only 4 weeks, while achieving specific productivities exceeding 20 pg/cell/day. Furthermore, we have used this approach to quickly screen several process-crucial parameters including IgG subtype, enhancer-promoter combination and UCOE™ length. The use of UCOE™-containing vectors in combination with automated robotic selection provides a rapid method for the selection of stable, high-expressing clones.
Contributors: Jeff Jia Cheng Hou, Ben S. Hughes, Matthew Smede, Kar Man Leung, Kara Levine, Susan Rigby, Peter P. Gray, Trent P.Munro
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Produits et services connexes du système de sélection de colonies de cellules de mammifères ClonePix 2
Applications particulières
Détection d’anticorps monoclonaux
La détection d’anticorps renvoie généralement au criblage et à l’identification d’anticorps spécifiques qui…
Développement de lignées cellulaires
Le développement de lignées cellulaires est une étape essentielle du processus de génération de molécules biopharmaceutiques…
Criblage d’expression à la surface cellulaire
De nombreuses protéines s’exprimant à la surface des cellules sont des cibles pour la découverte et le développement de…
Titre et criblage pour la productivité de clones
Un élément important de l’identification des clones de valeur est la détermination de la productivité de…
Criblage d’hybridomes
La détection d’anticorps renvoie généralement au criblage et à l’identification d’anticorps monoclonaux (…
Monoclonalité
Le développement de lignées cellulaires et l’assurance de monoclonalité constituent des étapes essentielles du processus de…
Avancées de nos clients
RÉUSSITES
Le Fred Hutchinson Cancer Research Center utilise le système ClonePix 2 pour cribler et isoler efficacement des clones d’hybridomes positifs
Le Fred Hutchinson Cancer Research Center utilise le système ClonePix 2 pour cribler et isoler efficacement des clones d’hybridomes positifs
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