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Solution complète pour le criblage automatisé et la sélection objective de clones de valeur dans divers types de cellules.

 

Le système de sélection de colonies de cellules de mammifères ClonePix® 2 est un système totalement automatisé de sélection de clones de valeur utilisés dans la détection d’anticorps et le développement de lignées cellulaires. Criblez davantage de clones en moins de temps avec la vérification de la monoclonalité au jour 0, puis criblez et identifiez les producteurs les plus performants en quelques semaines, et non en quelques mois.

Les hybridomes, cellules CHO, cellules souches et autres types de cellules sont évalués par imagerie et sélectionnés selon des paramètres que vous définissez. La manipulation des plaques, la lecture des codes-barres et la sélection sont entièrement intégrées, et toutes les données, y compris les images, sont enregistrées pour une analyse en aval. Le système de sélection accroît la probabilité de trouver des lignées cellulaires produites de manière optimale et réduit significativement le temps de travail.

  • Icône Efficacité

    Automatisez vos protocoles de détection d’anticorps et de développement de lignées cellulaires

    Le système de sélection ClonePix 2 est 10 fois plus rapide que les systèmes laborieux de clonage par dilution limite et FACS. Notre logiciel sophistiqué et la robotique intégrée permettent une vitesse de criblage supérieure à 10 000 clones par jour.

  • Icône Sélectionner

    Sélectionnez les cellules ayant les attributs souhaités avec l’assurance de monoclonalité dès le jour 0

    Crible et sélectionne facilement des clones en se basant sur la productivité des protéines, la spécificité des antigènes, la viabilité cellulaire et les niveaux d’expression des protéines recombinantes taguées.

  • Icône Précision

    Augmentez la probabilité d’identifier les clones de valeur tout en éliminant ou en récupérant les clones instables de façon précoce

    Précision de sélection < 1 mm. La sélection robotisée réduit le risque de perturbation des colonies. Les images des clones sélectionnés sont stockées avec les données.

ClonePix 2

ClonePix 2

Caractéristiques

  • Icône Portée

    Plusieurs méthodes de détection

    La lumière blanche permet d’identifier et de mesurer la morphologie des clones, leur taille et leur proximité. La fluorescence indique le niveau d’expression et/ou la spécificité. Il existe jusqu'à cinq filtres fluorescents disponibles pour le multiplexage.

  • Icône Stérilité

    Maintien de la stérilité

    De nombreuses caractéristiques et options de stérilisation, y compris un processus à lumière UV pour la stérilisation de l’intérieur de l’instrument ainsi qu’un système de lavage et de séchage halogène des pointes, sont standards.

  • Icône Connectivité

    Rangement intégré pour les plaques

    Inclut deux rayons de rangement pour les plaques source et destination, chacun ayant une capacité de 10 plaques.

  • Icône Sélectionne

    Formation discrète de colonies

    Le milieu semi-solide CloneMediaTM favorise le développement de cellules uniques en colonies discrètes et facilite l'étalement. Ce milieu permet de cribler une plus grande densité de clones.

  • Icône Efficacité

    Réactifs et milieux sans produit animal

    Le milieu de culture cellulaire CloneMedia sans produit animal et défini chimiquement est optimal pour accroître votre productivité et faciliter la visualisation des anticorps sécrétés lorsqu’il est utilisé avec l’agent de détection CloneDetectTM.

  • Icône Automatisation

    Options d’automatisation personnalisées*

    L’équipe Advanced Workflow Engineering Solutions peut personnaliser le système de monoclonalité et proposer des services supplémentaires tels que la vérification de monoclonalité intégrée.

*Le tarif, le délai de livraison et les caractéristiques varient selon les exigences techniques convenues ensemble. Ces exigences peuvent entraîner des changements de la performance standard.
 

Redéfinissez le criblage et la sélection des clones grâce à des protocoles de développement transformationnel de lignées cellulaires

Dotez votre équipe d'une analyse des données qui génère automatiquement une carte des clones et de leur taux de sécrétion à partir d’une série d’images générées in situ. Le ClonePix peut également être personnalisé pour inclure une garantie visuelle de monoclonalité au jour 0.* Cela signifie que votre équipe peut effectuer un criblage en un seul cycle, puis sélectionner les meilleurs produits en quelques semaines, et non en quelques mois.

 

Redéfinissez le criblage et la sélection des clones

Analyse et suivi des données : détecter plus rapidement les clones stables

Analyse et suivi des données

Analyse des données

  • Générez automatiquement une carte 2D des clones et de leur taux de sécrétion à partir d’une série d’images générées in situ
  • Criblez et sélectionnez des colonies en fonction de :
    • – La taille, la rondeur et la proximité des colonies voisines
    • – Le classement en fonction des taux de fluorescence
    • – Les colonies proches sont ignorées grâce au paramètre « proximité » du logiciel que vous contrôlez

 

Suivi des données

Toutes les données pertinentes associées à chaque colonie (y compris les images prises avant et après la sélection ainsi que les coordonnées de leur point de sélection) sont automatiquement enregistrées en vue d’un examen et d’une analyse en aval.

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Amélioration de la garantie de monoclonalité*

Même flux de travail ClonePix, désormais amélioré par une capacité d’imagerie haute résolution des cellules uniques le jour 0

Flux de travail de développement de lignées cellulaires stables

Le système ClonePix 2 amélioré permet de cribler et de sélectionner automatiquement les clones monoclonaux et à productivité élevée, le tout en un seul système. Criblez davantage de clones en moins de temps avec la vérification de la monoclonalité au jour 0, puis criblez et sélectionnez les produits les plus performants en moins de deux semaines.

  • Réduisez le temps de criblage de deux cycles à un cycle en fournissant des preuves visuelles de clonalité
  • La fonction d’acquisition rapide de Z Stack permet de détecter les cellules uniques dans tout le volume du milieu, et pas seulement dans un seul plan focal, au jour 0
  • Flux de travail simplifié à partir de l’identification des cellules uniques et du criblage de productivité grâce au système tout-en-un

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Amélioration pour les applications impliquant des cellules souches*

Identifiez les colonies de cellules souches clonales souhaitables pour le criblage haut débit et la sélection de colonies

Amélioration pour les applications impliquant des cellules souches broches de sélection de cellules souches

L’imagerie haute résolution identifie les colonies de cellules souches clonales souhaitables pour le criblage haut débit et la sélection de colonies. Des broches de sélection spécialisées permettent de transférer en douceur les cellules adhérentes sans cellule nourricière vers des plaques haute densité pour l’expansion clonale et l’analyse en aval.

  • Formation de colonies : les cellules souches individuelles mises en plaque à une faibledensité dans des plaques à 6 puits se divisent et se développent en colonies. La densité de la plaque est maintenue à un faible niveau pour garantir que les colonies sont dérivées d’une seule cellule mère.
  • Criblage de clones : les colonies de cellules souches dérivées de clones sont identifiées par leurs caractéristiques morphologiques souhaitables et sont sélectionnées dans les plaques à 6 puits à faible densité pour être transférées dans des plaques à 96 puits à plus forte densité afin de poursuivre le criblage. Le système de sélection de colonies de cellules de mammifères ClonePix® 2 peut être personnalisé avec des optiques haute résolution et des broches spécifiques aux cellules souches, ce qui permet de tirer parti de cette technologie établie dans les flux de travail impliquant des cellules souches.
  • Croissance cellulaire : la croissance cellulaire est déterminée en surveillant la division cellulaire sur une période donnée au moyen de l’imagerie sans marquage.
  • Criblage fonctionnel : Outre le suivi de la croissance, des tests cellulaires fonctionnels peuvent être réalisés. Il peut s’agir de tests évaluant le potentiel de différenciation, la pluripotence, la capacité à former des organoïdes 3D et d’autres caractéristiques souhaitables.

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*Le tarif, le délai de livraison et les caractéristiques varient selon les exigences techniques convenues ensemble. Les exigences de la solution peuvent entraîner un ajustement de la performance standard.

Les solutions personnalisées sont soumises aux Conditions d’achat des produits personnalisés de Molecular Devices.

Dernières ressources

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Applications du système de sélection de colonies de cellules de mammifères ClonePix 2

  • Développement de lignées cellulaires

    Développement de lignées cellulaires pour protéines recombinantes

    Le développement de lignées cellulaires est une étape essentielle du processus de création de molécules biopharmaceutiques, telles que les anticorps monoclonaux. Le processus commence souvent par la transfection du type de cellule hôte avec l’ADN codant pour la protéine thérapeutique d’intérêt, ce qui permet une intégration aléatoire ou dirigée de l’ADN cible dans le génome de la cellule hôte. Des milliers de clones sont criblés pour isoler les cellules rares qui présentent une productivité élevée, ce qui est un processus manuel fastidieux.

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    Criblage d’expression à la surface cellulaire

    Criblage d’expression à la surface cellulaire

    De nombreuses protéines s’exprimant à la surface des cellules sont des cibles pour la découverte et le développement de produits biopharmaceutiques. Par exemple, les récepteurs couplés aux protéines G (GPCR) constituent la plus grande classe de protéines de surface cellulaire et sont des cibles pour pratiquement 40 % des médicaments existants. La découverte et la sélection de clones de grand intérêt grâce à l’expression élevée à la surface cellulaire des GPCR à partir d’un pool de cellules transfectées peuvent s’avérer complexes. Le système ClonePix 2 est une méthode automatisée pour le criblage de vastes populations de cellules, augmentant ainsi la probabilité de découvrir un liant de haute affinité rare ou un producteur élevé.

  • Titre et criblage pour la productivité de clones

    Titre et criblage pour la productivité de clones

    Un élément important de l’identification des clones de valeur est la détermination de la productivité de colonies dérivées de cellules uniques. Le criblage pour la productivité au moyen d’approches traditionnelles est un processus laborieux et fastidieux, qui comporte plusieurs étapes, dont l’isolement de cellules uniques à partir d’une dilution limitante, suivie d’une évaluation du titre par ELISA. Le système ClonePix 2 combine la sélection des phénotypes, l’isolement de cellules uniques et le criblage de productivité en une seule étape, ce qui réduit considérablement le temps du criblage et augmente le nombre de candidats.

    Criblage d’hybridomes

    Criblage d’hybridomes

    La technique de détection d'anticorps renvoie généralement au criblage et à l’identification d’anticorps monoclonaux (mAb) qui ciblent un épitope spécifique pour le diagnostic et le traitement de maladies. Une approche commune pour la génération des anticorps monoclonaux comprend la fusion d’une cellule cancéreuse pré-mitotique avec un lymphocyte B terminal post-mitotique exprimant les anticorps provenant de la rate. La cellule fusionnée qui en résulte est un hybridome et a l’avantage de produire des mAb tout en se divisant pour se régénérer. Le criblage des hybridomes pour la spécificité de liaison ou la productivité peut être automatisé avec le système ClonePix 2.

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  • Détection d’anticorps monoclonaux

    Criblage spécifique aux antigènes

    La détection d’anticorps renvoie généralement au criblage et à l’identification d’anticorps spécifiques qui ciblent une molécule d’antigène pour le diagnostic et le traitement de maladies. La spécificité de l’anticorps se base sur sa capacité à se lier à l’épitope, une région unique sur la molécule d’antigène. Les anticorps thérapeutiques sont généralement monoclonaux, dérivés de cellules uniques et ciblent une région d’épitope unique sur l’antigène. Le système ClonePix 2 automatise le criblage et la détection rapide des clones spécifiques de l’antigène à partir d’une population hétérogène de cellules.

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    Monoclonalité

    Le développement de lignées cellulaires et l’assurance de la monoclonalité constituent des étapes essentielles du processus de génération de molécules biopharmaceutiques, telles que les anticorps monoclonaux. Une lignée cellulaire peut être établie après l’isolation d’une cellule viable unique exprimant fortement la protéine d’intérêt. La documentation de preuves de clonalité est l’une des étapes clés de ce processus. Cette preuve de clonalité est généralement documentée à partir d'images, où une image d’une cellule unique est générée et inclue dans les déclarations réglementaires.

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Caractéristiques et options du système de sélection de colonies de cellules de mammifères ClonePix 2

Ressources du système de sélection de colonies de cellules de mammifères ClonePix 2

Présentations
Vidéos et webinaires
Génération et développement de lignées cellulaires stables

Flux de travail de développement de lignées cellulaires stables

Flux de travail sur les hybridomes

Flux de travail sur les hybridomes

flux de travail sur les cellules de mammifère sécrétant des protéines non mAb

Flux de travail sur la sélection de cellules de mammifères à productivité élevée sécrétant des protéines non mAb - Présentation rapide de SynBioBeta

Identification rapides des anticorps neutralisants

Flux de travail optimal pour identifier rapidement les anticorps neutralisants dirigés contre les particules virales

Sélection d’une lignée cellulaire GPCR

Identification et sélection de lignées cellulaires GPCR avec ClonePix 2

Système ClonePix 2

ClonePix 2

  • Citation
    Dated: Jan 01, 2022
    Publication Name: Cancer Immunoprevention - Methods in Molecular Biology

    Monoclonal Antibodies Generation: Updates and Protocols on Hybridoma Technology

    Since its inception in 1975, the hybridoma technology revolutionized science and medicine, facilitating discoveries in almost any field from the laboratory to the clinic. Many technological advancements have been developed since then, to create these “magical bullets.” Phage and yeast display libraries expressing the variable heavy and light… View more

    Since its inception in 1975, the hybridoma technology revolutionized science and medicine, facilitating discoveries in almost any field from the laboratory to the clinic. Many technological advancements have been developed since then, to create these “magical bullets.” Phage and yeast display libraries expressing the variable heavy and light domains of antibodies, single B-cell cloning from immunized animals of different species including humans or in silico approaches, all have rendered a myriad of newly developed antibodies or improved design of existing ones. However, still the majority of these antibodies or their recombinant versions are from hybridoma origin, a preferred methodology that trespass species barriers, due to the preservation of the natural functions of immune cells in producing the humoral response: antigen specific immunoglobulins. Remarkably, this methodology can be reproduced in small laboratories without the need of sophisticate equipment. In this chapter, we will describe the most recent methods utilized by our Monoclonal Antibodies Core Facility at the University of Texas–M.D. Anderson Cancer Center. During the last 10 years, the methods, techniques, and expertise implemented in our core had generated more than 350 antibodies for various applications.

    Contributors: Ahmed Muhsin, Roberto Rangel, Long Vien, Laura Bover  
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  • Citation
    Dated: Dec 01, 2017
    Publication Name: Journal of Immunological Methods

    Sequential screening by ClonePix FL and intracellular staining facilitate isolation of high producer cell lines for monoclonal antibody manufacturing

    Screening and characterization of cell lines for stable production are critical tasks in identifying suitable recombinant cell lines for the manufacture of protein therapeutics. To aid this essential function we have developed a methodology for the selection of antibody expressing cells using fluorescence based ClonePix FL colony isolation and… View more

    Screening and characterization of cell lines for stable production are critical tasks in identifying suitable recombinant cell lines for the manufacture of protein therapeutics. To aid this essential function we have developed a methodology for the selection of antibody expressing cells using fluorescence based ClonePix FL colony isolation and flow cytometry analysis following intracellular staining for immunoglobulin G (IgG). Our data show that characterization of cells by flow cytometry early in the clone selection process enables the identification of cell lines with the potential for high productivity and helps to eliminate unstable cell lines. We further demonstrate a correlation between specific productivity (qP) and intracellular heavy chain (HC) content with final productivity. The unique combination of screening using ClonePix FL and the flow cytometry approaches facilitated more efficient isolation of clonal cell lines with high productivity within a 15 week timeline and which can be applied across NS0 and CHO host platforms. Furthermore, in this study we describe the critical parameters for the ClonePix FL colony based selection and the associated calculations to provide an assessment of the probability of monoclonality of the resulting cell lines.

    Contributors: Gargi Roya, Guillermo Miro-Quesadab, Li Zhuanga, Tom Martina, Jie Zhub, Herren Wua, Marcello Marellia, Michael A.Bowena  
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  • Citation
    Dated: Dec 14, 2015
    Publication Name: 24th European Society for Animal Cell Technology (ESACT) Meeting: C2P2: Cells, Culture, Patients, Products

    CHO-DHFR cell line development platform: Application of Clonepix and Automated Mini Bioreactor (AMBR) technologies to meet accelerated timelines

    The Holy Grail sought by all Bioprocess Cell Line Development (CLD) groups is achieving high yields from easily-cultured, robustly-growing cells in timelines measured in weeks rather than months. As the first bottleneck in process development, CLD must first birth its product for upstream and downstream groups to initiate their own reproductive… View more

    The Holy Grail sought by all Bioprocess Cell Line Development (CLD) groups is achieving high yields from easily-cultured, robustly-growing cells in timelines measured in weeks rather than months. As the first bottleneck in process development, CLD must first birth its product for upstream and downstream groups to initiate their own reproductive cycles. To facilitate shortened CLD timelines, scientists have turned to new technologies and automation platforms. Emerging high-throughput instrumentation such as Clonepix and Automated MicroBioreactors (AMBR) have been enthusiastically integrated into stable cell line generation platforms; however, application of these methodologies among users is divergent.

    Contributors: Venkata R Mangalampalli, Dyane Wycuff, Mingzhong Chen, David Berlinger, Elizabeth H Scheideman, Amritha Menon, Guilia Fabozzi, Althaf Hussain & Richard M Schwartz  
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  • Citation
    Dated: May 25, 2014
    Publication Name: New Biotechnology

    High-throughput ClonePix FL analysis of mAb-expressing clones using the UCOE expression system

    Therapeutic recombinant monoclonal antibodies (mAbs) are commonly produced by high-expressing, clonal, mammalian cells. Creation of these clones for manufacturing remains heavily reliant on stringent selection and gene amplification, which in turn can lead to genetic instability, variable expression, product heterogeneity and prolonged development… View more

    Therapeutic recombinant monoclonal antibodies (mAbs) are commonly produced by high-expressing, clonal, mammalian cells. Creation of these clones for manufacturing remains heavily reliant on stringent selection and gene amplification, which in turn can lead to genetic instability, variable expression, product heterogeneity and prolonged development timelines. Inclusion of cis-acting ubiquitous chromatin opening elements (UCOE™) in mammalian expression vectors has been shown to improve productivity and facilitate high-level gene expression irrespective of the chromosomal integration site without lengthy gene amplification protocols. In this study we have used high-throughput robotic clone selection in combination with UCOE™ containing expression vectors to develop a rapid, streamlined approach for early-stage cell line development and isolation of high-expressing clones for mAb production using Chinese hamster ovary (CHO) cells. Our results demonstrate that it is possible to go from transfection to stable clones in only 4 weeks, while achieving specific productivities exceeding 20 pg/cell/day. Furthermore, we have used this approach to quickly screen several process-crucial parameters including IgG subtype, enhancer-promoter combination and UCOE™ length. The use of UCOE™-containing vectors in combination with automated robotic selection provides a rapid method for the selection of stable, high-expressing clones.

    Contributors: Jeff Jia Cheng Hou, Ben S. Hughes, Matthew Smede, Kar Man Leung, Kara Levine, Susan Rigby, Peter P. Gray, Trent P.Munro  
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Produits et services connexes du système de sélection de colonies de cellules de mammifères ClonePix 2