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Protocole de développement de lignées cellulaires

Flux de travail de génération de protéines recombinantes à partir de lignées cellulaires telles que CHO, Hybridome ou HEK 293.

Développement de lignées cellulaires pour protéines recombinantes

Afin d’obtenir de hauts rendements de production de protéines recombinantes, les lignées cellulaires telles que CHO, Hybridome ou HEK 293 sont des plateformes habituellement choisies. Le processus de développement de lignées cellulaires stables commence par la transfection de cellules hôtes (CHO ou HEK 293) avec des plasmides recombinants ou la fusion cellulaire pour les hybridomes. Après la transfection ou la fusion cellulaire, un grand nombre de clones sont criblés et sélectionnés en se basant sur l’expression de la protéine d’intérêt (agents biologiques thérapeutiques). Une fois les clones candidats identifiés, chaque « concordance » est confirmée, validée et caractérisée par séquençage de l’ADN et plusieurs tests analytiques en aval. Cette étape terminée, les principaux clones sont élargis et extrapolés là où se déroulent les bioprocédés.

Étapes d’un protocole typique de développement de lignées cellulaires

Étapes d’un protocole typique de développement de lignées cellulaires

Flux de travail de génération de protéines recombinantes

  1. Transfection : transfecter des cellules hôtes avec des plasmides recombinants codant pour une protéine d’intérêt.
  2. Sélection d’un pool de cellules transfectées : sélectionner des cellules qui sont stables et qui produisent la protéine d’intérêt.
  3. Criblage et sélection de clones : cribler et sélectionner des clones pour l’expression élevée de la protéine d’intérêt.
  4. Caractérisation des lignées cellulaires : valider et caractériser chaque clone pour établir sa stabilité et sa productivité.
  5. Expansion et évaluation en aval : développer des clones et réaliser des bioprocédés en aval. Une banque de cellules est également créée.

Des atouts pour optimiser vos flux de travail de développement de lignées cellulaires

Ressources sur le flux de travail de développement de lignées cellulaires

Vidéos et webinaires

Les flux de travail nombreux et variés de développement de lignées cellulaires

Les flux de travail nombreux et variés de développement de lignées cellulaires