Développement de lignées cellulaires pour protéines recombinantes
Afin d’obtenir de hauts rendements de production de protéines recombinantes, les lignées cellulaires telles que CHO, Hybridome ou HEK 293 sont des plateformes habituellement choisies. Le processus de développement de lignées cellulaires stables commence par la transfection de cellules hôtes (CHO ou HEK 293) avec des plasmides recombinants ou la fusion cellulaire pour les hybridomes. Après la transfection ou la fusion cellulaire, un grand nombre de clones sont criblés et sélectionnés en se basant sur l’expression de la protéine d’intérêt (agents biologiques thérapeutiques). Une fois les clones candidats identifiés, chaque « concordance » est confirmée, validée et caractérisée par séquençage de l’ADN et plusieurs tests analytiques en aval. Cette étape terminée, les principaux clones sont élargis et extrapolés là où se déroulent les bioprocédés.
Étapes d’un protocole typique de développement de lignées cellulaires
Flux de travail de génération de protéines recombinantes
- Transfection : transfecter des cellules hôtes avec des plasmides recombinants codant pour une protéine d’intérêt.
- Sélection d’un pool de cellules transfectées : sélectionner des cellules qui sont stables et qui produisent la protéine d’intérêt.
- Criblage et sélection de clones : cribler et sélectionner des clones pour l’expression élevée de la protéine d’intérêt.
- Caractérisation des lignées cellulaires : valider et caractériser chaque clone pour établir sa stabilité et sa productivité.
- Expansion et évaluation en aval : développer des clones et réaliser des bioprocédés en aval. Une banque de cellules est également créée.
Des atouts pour optimiser vos flux de travail de développement de lignées cellulaires
Ressources sur le flux de travail de développement de lignées cellulaires
Note d'application
Accélération des lignées cellulaires issues de l’édition génomique grâce à l’imageur CloneSelect Imager FL
Accelerating Gene Edited Cell Lines with the CloneSelect Imager FL
La technologie d’édition génomique permet de manipuler l’ADN en le supprimant, en l’ajoutant ou en le modifiant à l’aide de divers outils.
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How to Develop Monoclonal Cell Lines for Stem Cell Engineering
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Sélection accélérée des clones pour les cellules CHO recombinantes grâce au tri par fluorescence avec l’instrument CloneSelect Single-Cell Printer F.Sight
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Évolution du rôle des cellules CHO dans le développement de lignées cellulaires
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Assurance élevée de monoclonalité pour le développement de lignées cellulaires
High assurance monoclonality for cell line development
Double confirmation de la clonalité. Preuves visuelles confirmant le dépôt de cellules uniques, et cellule unique dans une plaque à 96 puits et 384 puits après tri
Livre électronique
Optimisez vos lignées cellulaires de grand intérêt
Optimize your high-value cell lines
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Molecular Devices Advancing your Cell Line Development Workflow through Automated and Proven Technologies
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Accélérez le développement de lignées cellulaires
Accelerate Cell Line Development
Découvrez dans ce document PDF comment accélérer votre développement de lignées cellulaires et détecter plus rapidement les « hits » de valeur que vous recherchez.
Vidéos et webinaires
Les flux de travail nombreux et variés de développement de lignées cellulaires
