Détection, quantification et analyse des protéines
Optimiser le processus de quantification des protéines
Détecter, quantifier et analyser les protéines
La détection, la quantification et l’analyse des protéines sont essentielles à l’étude d’un grand nombre de processus biologiques. La mesure de la concentration des protéines est nécessaire pour les processus allant de la purification et du marquage des protéines à la préparation des échantillons pour l’électrophorèse.
La quantification des protéines est la mesure de la concentration totale des protéines dans un échantillon. Les protéines peuvent être quantifiées directement par absorbance à 280 nm, ou indirectement en utilisant des méthodes colorimétriques (BCA, Bradford, etc.) ou fluorimétriques offrant des avantages tels qu’une plus grande sensibilité. Pour identifier et mesurer une protéine spécifique dans un échantillon complexe, par exemple un sérum ou un lysat cellulaire, on peut utiliser un test immuno-enzymatique (ELISA).
La signalisation cellulaire et d’autres processus biologiques peuvent être analysés au moyen de protéines fluorescentes. Par exemple, la protéine fluorescente verte (GFP) peut être exprimée dans des cellules vivantes et être utilisée pour visualiser la localisation et la dynamique des protéines dans des conditions expérimentales. Le tryptophane, un acide aminé dont les propriétés d’émission de fluorescence sont affectées par son micro-environnement, est également utilisé pour obtenir des informations sur les changements de l’état conformationnel des protéines.
Méthodes de quantification et d’analyse des protéines
Les lecteurs de microplaques avec des modes de détection par absorbance, fluorescence et luminescence offrent une solution polyvalente pour la quantification et l’étude des protéines. Nos notes d’application démontrent comment ces instruments peuvent être utilisés pour obtenir des résultats et les analyser.