Numération cellulaire

Numération cellulaire

L'évaluation par numération cellulaire de différents paramètres tels que la prolifération, la cytotoxicité ou la confluence peut être rapidement effectuée par imagerie à fond clair ou fluorescente sur les systèmes d’imagerie automatisée ImageXpress Nano ou ImageXpress Pico avec le logiciel d’analyse CellReporterXpress intégré.

La cytométrie est une technique de quantification des cellules se basant sur des caractéristiques particulières telles que la taille, la morphologie ou les taux d’expression de protéines. La cytométrie en image est une technique puissante associant la microscopie à faible grossissement à des outils d’analyse et d’imagerie. La cytométrie en image est utile pour fournir des informations sur un grand nombre de caractéristiques cellulaires d’une vaste population de cellules, le tout en un seul test. La cytométrie en image peut être utilisée sur des cellules non marquées ou des cellules marquées par fluorescence et peut être répétée sur une population afin de fournir des informations sur la dynamique cellulaire dans le temps.

Techniques de numération cellulaire

  • Cytotoxicité

    Cytotoxicité

    La cytotoxicité est souvent mesurée en réponse à un traitement expérimental ou à un médicament potentiel. Il est essentiel de pouvoir détecter facilement la cytotoxicité dans les cellules traitées afin de développer de nouveaux traitements ou de comprendre les voies de signalisation cellulaire qui affectent la santé des cellules. Les indicateurs courants de cytotoxicité incluent le taux d’ATP dans une population de cellules et l’intégrité des membranes cellulaires, les deux pouvant être mesurés par divers tests réalisés sur microplaques.

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  • Viabilité cellulaire

    Viabilité cellulaire

    La viabilité cellulaire peut être évaluée en examinant des paramètres tels que l’intégrité de la membrane cellulaire ou l’activité des enzymes cellulaires. Sur les lecteurs de microplaques, ces paramètres peuvent être détectés au moyen de réactifs fluorescents. Par exemple, un colorant rouge imperméant cellulaire se liant à l’ADN ne colore que les cellules mortes ou moribondes dont la membrane est défaillante, tandis qu’un colorant vert de cellules vivantes ne devient fluorescent que lorsque des enzymes métaboliques sont actives.

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  • Migration de cellules

    Migration de cellules

    La migration cellulaire, le mouvement des cellules d’un endroit vers un autre, est un composant essentiel des processus biologiques normaux et anormaux. La migration des cellules marquées par fluorescence d’une zone d’un puits de microplaque vers une autre peut être surveillée à l’aide d’un système d’imagerie cellulaire. Le logiciel d’analyse automatisé calcule la valeur de migration cellulaire dans chaque puits.

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  • Analyse du cycle cellulaire

    Analyse du cycle cellulaire

    La transition d’une cellule à travers le cycle cellulaire peut être surveillée grâce aux protéines du cycle cellulaire marquées par fluorescence, exprimées et dégradées de manière cyclique. La technologie FUCCI se base sur la surexpression des protéines géminine et Cdt1 qui dépendent du cycle cellulaire, respectivement fusionnées à un fluorophore vert et à un fluorophore rouge. Les niveaux de Cdt1 sont au plus haut en phase G1 donc par conséquent, les cellules en G1 apparaissent en vert ; les niveaux de géminine augmentent à la fin des phases S, G2 et M, et donc, durant ces phases, les cellules apparaissent en rouge.

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Ressources sur la numération cellulaire

Produits et services connexes de la numération cellulaire

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