Numération cellulaire
Découvrez comment compter les cellules avec diverses méthodes, techniques et technologies
Méthodes et techniques pour compter les cellules
Pouvoir quantifier avec précision le nombre de cellules dans des microplaques à puits multiple permet d'étudier la santé ou la prolifération cellulaire. Ces applications peuvent utiliser des tests en point final pour l’imagerie de noyaux colorés par fluorescence ou exiger une imagerie à lumière transmise robuste de cellules fixées ou vivantes non colorées. Dans les deux cas, la numération des cellules par segmentation logicielle doit être rapide et fiable.
Ici, nous abordons les diverses méthodes et techniques utilisées pour évaluer la prolifération, la cytotoxicité et la confluence en utilisant la numération cellulaire, qui peut être rapidement effectuée par imagerie sur fond clair ou par fluorescence en utilisant un système d’imagerie automatisé et un logiciel d’analyse.
Numération cellulaire par l'imagerie automatisée des cellules
La numération cellulaire est essentielle à de nombreuses expériences biologiques. Dans le cadre des tests tels que la toxicité des composés de médicaments, la prolifération cellulaire et l’inhibition de la division cellulaire, il est nécessaire d’évaluer le nombre ou la densité des cellules dans un puits. L’imagerie automatisée peut accélérer considérablement le processus de comptage des cellules tout en réduisant le travail manuel et l’erreur humaine.
L’exemple de flux de travail ci-dessous montre que vous pouvez simplement placer l’échantillon dans le système d’imagerie cellulaire automatisé ImageXpress® Pico et, après un paramétrage simple dans le logiciel, le système compte automatiquement les cellules, vous laissant libre de vaquer à d’autres tâches. Les cellules peuvent être comptées au moyen de diverses méthodes, telles que la numération cellulaire sans marquage (label-free) sous lumière transmise ou la détection de colorant nucléaire par imagerie par fluorescence.
Technologie StainFree Cell Detection : une méthode sans marquage pour analyser les numérations cellulaires et la confluence des cellules
Les tests cellulaires d’imagerie nécessitent généralement l’utilisation de sondes fluorescentes pouvant se révéler toxiques pour les cellules vivantes ou ne peuvent être utilisées que dans des cellules fixées. La méthode sans marquage (label-free) pour analyser les numérations cellulaires et la confluence des cellules vous permet de surveiller quantitativement la prolifération cellulaire et la santé des cellules sans flux de travail fastidieux pouvant perturber la viabilité cellulaire.
Le lecteur de microplaques multimode SpectraMax® i3 avec le cytomètre d’imagerie SpectraMax® MiniMax™300 utilise la technologie unique StainFree™ Cell Detection en attente de brevet, qui vous permet de réaliser des tests de prolifération cellulaire, de cytotoxicité et d’autres tests sans marquage nucléaire comme sur les systèmes DAPI, qui s’intercale avec l’ADN, et sans colorant de cellules vivantes qui sont toxiques pour les cellules sur le long terme.
Flux de travail pour l’analyse cellulaires avec la technologie StainFree par rapport au colorant rouge vif par rapport au système DAPI. Le flux de travail StainFree permet d’économiser environ 70 minutes par rapport à la fixation et au marquage avec le système DAPI. En outre, les cellules analysées avec la technologie StainFree restent totalement viables et peuvent être utilisées dans d’autres tests.
Compter les cellules avec la technologie StainFree
L’algorithme StainFree Cell Detection élimine le marquage des cellules pour la numération cellulaire et les mesures de confluence grâce à une technologie d’analyse à lumière transmise (LT) exclusive. Ici, nous décrivons l’analyse de nombreux types de cellules couramment utilisés avec notre méthode sans marquage (label-free).
Dernières ressources
Ressources sur la numération cellulaire
Produits et services connexes de la numération cellulaire
Les compteurs de cellules automatisés, comme le lecteur de microplaques multimode SpectraMax® i3x avec cytomètre SpectraMax MiniMax ou le système d’imagerie cellulaire automatisée ImageXpress® Pico, peuvent évaluer la prolifération, la cytotoxicité ou la confluence par imagerie en fond clair ou par fluorescence.
Le lecteur de microplaques multimode SpectraMax i3x avec cytomètre SpectraMax MiniMax permet une imagerie et une analyse rapides des cellules et vous donne une vision de premier plan sur les modifications phénotypiques qui accompagnent la cytotoxicité, la prolifération cellulaire et l'expression des protéines. Notre technologie de numération cellulaire StainFree™ inclut désormais des canaux de détection verts et rouges fluorescents et des caractéristiques d’analyse en fond clair supplémentaires.
Le système d'imagerie cellulaire automatisée ImageXpress Pico est un compteur de cellules automatisé utilisant la lumière transmise ou l’imagerie fluorescente pour capturer des sorties riches en données, telles que la taille du noyau, les zones cellulaires totale et moyenne et l’intensité. Outre les méthodes standard de numération cellulaire pour détecter les corps cellulaires ou les noyaux fluorescents, le logiciel inclut trois protocoles supplémentaires pour compter les cellules dans la lumière transmise selon la taille et la forme des cellules.